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[求助]
求助——木霉產(chǎn)葡聚糖酶的有關(guān)問題，希望高手們指點(diǎn)一下
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小Mi 在做有關(guān)木霉菌屬發(fā)酵產(chǎn)內(nèi)切葡聚糖酶的課題，但是在發(fā)酵過程中出現(xiàn)了以下問題： 1. 據(jù)查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，絲狀真菌霉菌在液體發(fā)酵液中能夠產(chǎn)生均勻的菌絲球，然后分泌胞外酶，但是經(jīng)過我優(yōu)化（碳源、氮源以及添加固體載體），發(fā)酵液中始終沒有形成均勻的菌絲球，而是一些菌絲團(tuán)，或者菌絲片段。 pS：我是將孢子懸浮液接種在種子培養(yǎng)基中的，在種子培養(yǎng)基中就沒有形成菌絲球，發(fā)酵液中成菌絲球是否與種子培養(yǎng)基有關(guān)？ 2.優(yōu)化完，蛋白含量增加的不多，總蛋白含量從100mg/L提升到了500mg/L，內(nèi)切酶活性提高的也不大。希望大蝦們指導(dǎo)一下。 3. 因?yàn)橐院笮枰龇糯髮?shí)驗(yàn)，所以我做了個上罐初試實(shí)驗(yàn)，就是那種7L發(fā)酵罐，裝液量4L（附圖）。但是菌體全都糊在發(fā)酵液上層，泡沫頂?shù)缴w子上了，加了很多消泡劑也不管用，取樣管已經(jīng)被堵。請教各位大蝦有么有解救小米的辦法？ IMG_20121104_100257.jpg |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
糖糖love妮子: 金幣+15 2013-03-17 18:40:53
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糖糖love妮子: 金幣+15 2013-03-17 18:40:53
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1、你在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的現(xiàn)象我們實(shí)驗(yàn)室有人也出現(xiàn)過，她是改變了很多載體，比如豆粕、玻璃球，最后發(fā)現(xiàn)玻璃球較好，但是玻璃球不能太大，要那種細(xì)小均勻的，利用較低轉(zhuǎn)速的回轉(zhuǎn)式或震蕩式搖床培養(yǎng)，這樣既可以不打斷菌絲，也不會形成菌絲團(tuán)。你可以試試。 2、如果你的菌株是自己從自然界篩選的，發(fā)酵優(yōu)化效果肯定會提升不少，但是如果菌株是自己實(shí)驗(yàn)室早就有的，你得先確定別人是否優(yōu)化過你使用的發(fā)酵配方。不然你就紫外和化學(xué)誘變一下看效果。 3、對于有菌絲體的霉菌來說，7L發(fā)酵罐，裝液量4L是很高的了。我們一般裝2-3 L。有菌絲體位于發(fā)酵液上層，堵塞取樣管很正常，這需要你改變裝液量，改換發(fā)酵罐的轉(zhuǎn)軸，用那種不易打斷菌絲體的有折的轉(zhuǎn)軸。 不知道我說的這些對你是否有幫助，祝你實(shí)驗(yàn)順利！ |
2樓2013-03-08 10:04:34
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