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求助蛋白質(zhì)酶解成肽的實(shí)驗(yàn)方法
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| 大家好!現(xiàn)我想將牛血清白蛋白用胰蛋白酶水解成多肽,看文獻(xiàn)蛋白質(zhì)與酶投的比例都不同,請(qǐng)問(wèn)這個(gè)比例應(yīng)該如何選擇。胰蛋白酶酶解后的多肽分子量在多大范圍?我參考文獻(xiàn)方法0.4g BSA與30mg在pH8.5 20mM的硼酸緩沖液中水浴37度反應(yīng)12h.結(jié)果用截留分子量為10K的超濾離心管離心后,分別將濾液和被截留的兩部分溶液凍干,結(jié)果發(fā)現(xiàn)水解后所得產(chǎn)物大部分還是分子量大于10K的,而小于10k的不多,現(xiàn)在都不知道是水解后所得多肽主要還是分子量為大于10K的還是酶解沒(méi)完成。請(qǐng)做過(guò)或熟悉過(guò)程的友友幫忙分析和指導(dǎo)下,非常感謝!本人第一次做這個(gè),不太了解 |

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