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ligangpku金蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR后雙鏈在變性膠上打不開
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大家好： 我最近在做一個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)，引物都是自己合成的，模板鏈為36個(gè)堿基。但是PCR后做乙醇沉淀再走膠后，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物條帶總是比標(biāo)準(zhǔn)的模板鏈高出大約10個(gè)堿基的位置，我嘗試了8對引物組合，仍然如此。 因此，我懷疑是互補(bǔ)數(shù)太多，在變性膠上依然沒有打開，請問大家可有類似的經(jīng)歷，是否有相應(yīng)的解決方案。 ps：本人已經(jīng)做過酶切實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)可以切斷，酶切以后的條帶是對的。準(zhǔn)備定一對互補(bǔ)的引物，看一下位置。DNA測序估計(jì)不太可行。只是，實(shí)在不太明白為什么變性膠打不開…………，謝謝各位。 |
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