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bbq378鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
PCV的感染性克隆載體構(gòu)建
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求大家解疑 在PCV2的感染性克隆載體的構(gòu)建中，為什么要先分段擴(kuò)增圓環(huán)的全基因，然后在用帶酶切位點(diǎn)的引物擴(kuò)全基因，插入到適當(dāng)載體中。。。。。。 求大家?guī)兔α�，迷茫�? |
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Everpower
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1.3
- 帖子: 8
- 在線(xiàn): 8.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2080101
- 注冊(cè): 2012-10-23
- 專(zhuān)業(yè): 獸醫(yī)傳染病學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-06-17 23:07:29
kx444555: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2013-06-17 23:07:29
因?yàn)镻CV2病毒基因是環(huán)狀的，所以先用兩對(duì)基因擴(kuò)增PCV2，把環(huán)變成兩個(gè)有重疊區(qū)域的片段，然后再用帶酶切的引物擴(kuò)增PCV2的全長(zhǎng)。假如直接用帶酶切位點(diǎn)的PCV2擴(kuò)增全長(zhǎng)的引物擴(kuò)增PCV2全基因組，因?yàn)镻CV2是環(huán)狀的，所以上游引物和下游引物與PCV2的模板結(jié)合時(shí)引物的一部分堿基不能與模板結(jié)合，擴(kuò)增效率很低。 |
2樓2013-06-17 22:07:14
thinkerboy
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3.6
- 散金: 1
- 帖子: 69
- 在線(xiàn): 44.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2099002
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3樓2013-12-26 10:57:47
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