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yq19880610新蟲(chóng) (初入文壇)
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MTT粉末稱(chēng)取時(shí)用避光嗎？
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| MTT粉末稱(chēng)取的時(shí)候用避光嗎？怎么配置？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
amisking: 金幣+5, MolEPI+1, 鼓勵(lì)積極發(fā)帖幫助解答問(wèn)題。 2013-03-20 20:28:14
yq19880610: 金幣+1, ★★★很有幫助 2013-03-21 08:33:54
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yq19880610: 金幣+1, ★★★很有幫助 2013-03-21 08:33:54
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正好明天我也要配制MTT，今天剛找的資料，希望對(duì)你有幫助 MTT 溶液的配制 通常MTT 配成的終濃度為5mg/ml,須用PBS或生理鹽水做溶劑。市面上一般MTT的包裝為100mg,250mg或1g 1、對(duì)于100mg這樣的小包裝，廠(chǎng)家都是將MTT放入小管中的，個(gè)人建議不要再用天平稱(chēng)量分裝，而應(yīng)該一次性將其全配制成溶液，如100mg用20mlPBS來(lái)溶解。 具休做法：預(yù)先在50ml離心管(沒(méi)有的話(huà)，可用培養(yǎng)瓶替代)加入20ml PBS，從中先吸取500-1000ul PBS裝入含MTT的小管中，吹打若干次后將其移入50ml離心管，然后再混勻。可以重復(fù)幾次，以使小管中的MTT不殘留于管內(nèi)。將MTT完全混勻后，用0.22μm濾膜過(guò)濾以除去溶液里的細(xì)菌，分裝避光(避光袋或是黑紙、錫箔紙包住)可長(zhǎng)期保存于-20度。按細(xì)胞培養(yǎng)板每孔需加10ul計(jì)算，一般每96孔板約需1ml，所以分裝時(shí)可考慮每管分裝1ml。 2、對(duì)于大包裝，可按上述方法稱(chēng)取一部分溶解，也有人將粉劑分裝在EP管里，用的時(shí)候現(xiàn)配，直接往培養(yǎng)板中加。 注意事項(xiàng)： 1、在配制和保存的過(guò)程中，容器最好用鋁箔紙包住。 2、配成的MTT需要無(wú)菌，MTT對(duì)菌很敏感 3、MTT一般最好現(xiàn)用現(xiàn)配，過(guò)濾后4度避光保存兩周內(nèi)(個(gè)人曾做過(guò)4度避光保存4周的MTT溶液，效果仍然不錯(cuò))有效，或配制成5mg/ml保存在-20度長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當(dāng)MTT變?yōu)榛揖G色時(shí)就絕對(duì)不能再用。 4、MTT有致癌性，用的時(shí)候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套. |
3樓2013-03-20 20:23:47
2樓2013-03-20 15:50:45
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