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晏育偉
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[求助]
RT-PCR問題
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寄生蟲的某目的基因的表達(dá)量較低，在28左右，為驗證其在組織中不同時期的表達(dá)量差異，設(shè)計RT-PCR實驗。共提了6管RNA，1、2兩管是直接從寄生蟲中提取，3、4、5、6是從感染了此種寄生蟲的動物組織中提�。籗YBR熒光定量PCR兩步法時，1、2樣品的擴(kuò)增曲線和溶解曲線良好，可是3、4、5、6卻不行；懷疑是樣品有問題，以cDNA為模板，用RT-PCR引物做普通PCR，能擴(kuò)增出特異性條帶，無引物二聚體。請問我這實驗可能是哪里出問題了呢？謝謝各位了！ PS：附上圖片，請大家?guī)兔Ψ治龇治觥?br /> 說明一下：擴(kuò)增曲線，前面四條是1、2兩樣品的目的基因；后面四條是1、2兩樣品的內(nèi)參基因的。（每個樣品做了兩個重復(fù)） 電泳圖：1-6泳道是目的基因，7為水對照，8-13為內(nèi)參基因。 擴(kuò)增曲線.jpg 溶解曲線.jpg 電泳圖.jpg |
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