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[交流]
細(xì)菌的活性成分提取
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| 如題：大家有沒有誰是做細(xì)菌活性成分提取的，你們是如何做的？結(jié)果怎么樣？提出化合物解譜好解嗎？？？歡迎大家來討論 |
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發(fā)什么不得聽老師的，老師讓發(fā)就發(fā)，不讓發(fā)還不得干瞪眼阿。你沒聽懂我的意思，我們是自己裝的柱子，過柱子過程中，一個(gè)餾分一個(gè)餾分的接的然后分析液相檢測(cè)的，基本上三步到四步柱子就分出來了，用的普通的玻璃層析柱，加個(gè)蠕動(dòng)崩加壓。把柱子裝好了，柱效不比制備液相低。制備液相一般反向填料ODS用的多，我們實(shí)驗(yàn)室有，沒用，試了幾次不行就拉倒了，估計(jì)讓誰把柱子污染了。三大譜測(cè)唄。我們沒用反向也沒用凝膠，我們用大孔樹脂+層析樹脂+離子交換層析樹脂。 |
9樓2013-04-02 11:03:22
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豆哥: 金幣+1, 謝謝 2013-03-30 11:42:19
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| 關(guān)鍵是看你要提取的是哪一類的物質(zhì)，多肽、蛋白、細(xì)胞因子 、糖肽、脂肽、內(nèi)酯類、小分子化合物。水溶性的還是脂溶性的。你說的太泛了。你這個(gè)是基因產(chǎn)品，還是普通的發(fā)酵產(chǎn)品，比如胰島素阿還是埃博霉素阿。如果你只是拿到東西，這種一般就好辦了。先對(duì)你的物質(zhì)進(jìn)行富集，在進(jìn)行粗提，最后精制。我做過一個(gè)脂肽類的分子量1300多，做了兩年，解譜肯定沒有問題，關(guān)鍵是做600M核磁，找人解一下得了，發(fā)了。過各種柱子肯定是少不了的，呵呵。 |
2樓2013-03-30 11:28:37
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我們實(shí)驗(yàn)室得到了一株生防芽孢桿菌，對(duì)植物病原菌有很強(qiáng)的抑制活性，所以想知道里面是什么物質(zhì)在起作用，可能是脂肽類，也可能是小分子，還有可能是蛋白質(zhì)，現(xiàn)在就是不知道是哪一類的，小規(guī)模發(fā)酵了一下，分了四個(gè)部分，酸沉，醇沉，有機(jī)溶劑萃取，硫酸銨沉淀法，現(xiàn)在在測(cè)活，應(yīng)該就可以確定是什么了！你是用液相分的？還是用的普通方法，硅膠凝膠反相分出來的？還有你只用核磁就確定出結(jié)構(gòu)了嗎？還有你跑板硫酸顯色后你分到的那個(gè)點(diǎn)是什么顏色的？成點(diǎn)性好嗎？ |
3樓2013-03-30 21:30:04
4樓2013-03-30 21:30:57
5樓2013-04-01 08:01:04
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| 文章老師沒讓發(fā)還，想發(fā)高級(jí)別的。我們的東西是脂肽類的，有13個(gè)氨基酸的環(huán)，還有一個(gè)羧酸尾巴，三大譜肯定要做，幾千塊錢，核磁做完基本結(jié)構(gòu)不就出來了。我們的東西是水溶性的�；舅悸肪褪沁^柱子+液相檢測(cè)。沒用制備，就是自己裝填的玻璃柱，用個(gè)蠕動(dòng)泵加壓，接了餾分，液相檢測(cè)，分純了，凍干檢測(cè)就行了。后面還有好多實(shí)驗(yàn)要做的�？咕钚允裁吹�，毒性毒理。硅膠柱我們很少用的，除非你的東西是脂溶性的。我們不怎么點(diǎn)板，就是液相檢測(cè)的。點(diǎn)板麻煩。分這個(gè)東西費(fèi)老鼻子勁了，光填料試了好多種，就花了好幾萬大洋。 |
6樓2013-04-01 09:15:20
7樓2013-04-01 14:13:11
8樓2013-04-01 14:15:49
10樓2013-04-03 00:28:22
11樓2013-04-03 06:44:57
13樓2014-07-19 14:30:32
簡單回復(fù)
79046332412樓
2013-05-11 15:29
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