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jinqimaggie鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR miRNA的模板 純化后濃度過低怎么辦 謝謝!
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我用的 phusion DNA polymerase, dNTPs DMSO 和引物(有重疊區(qū)域)來做miRNA的模板, 做了十管50微升的反應(yīng),30個cycle,溫度分別是98,98,58,72,4 攝氏度。 然后我把十管收集起來一起純化,(cycle pure kit),純化后濃度只有23ng/微升。 但是聽老師說要想做后面的轉(zhuǎn)錄,模板濃度要至少在微克數(shù)量級, 我該怎么提高模板濃度, miRNA的分子量在72bp,它的模板應(yīng)該也不大, 請各位大神幫助,謝謝! |
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