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[求助]
HPLC 可溶性單糖
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所用儀器Agilent 1260 糖柱 流動(dòng)相 乙腈和水 RID 檢測(cè)器 現(xiàn)在出的峰總是嚴(yán)重拖尾 而且分離效果不好，附件中 可是小蟲又不想做衍生處理，樣品是根系分泌物， 請(qǐng)教 條件怎么修改才能獲得較理想的樣品峰。標(biāo)樣分離效果還可以 一共測(cè)了7種單糖 |
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2013-04-04 10:04:34, 21.91 K
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mandywang: 金幣+10, ★有幫助 2013-04-07 21:46:22
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1.使用RID檢測(cè)器首先明確一點(diǎn)，只能使用一個(gè)通道，所以我看你說(shuō)的流動(dòng)相是乙腈和水，這應(yīng)該事先預(yù)混合好抽濾后放在一個(gè)通道內(nèi)使用。（因?yàn)镽ID是一通用型檢測(cè)器，它對(duì)流動(dòng)相整體都有響應(yīng)）。這樣可以降低噪音。 2.我看有的峰是平頭峰，應(yīng)該是超出線性范圍了。應(yīng)該降低進(jìn)樣量。這樣可以有好的分離，減少拖尾。 3.RID 檢測(cè)池的溫度設(shè)定在35度以上，同樣的柱溫箱的溫度要設(shè)定在35度 或40度。這樣也可以降低噪音。 |
2樓2013-04-05 12:54:26
4樓2013-04-06 10:49:42
fujinguo06
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【答案】應(yīng)助回帖
| 看過數(shù)據(jù)，首先流動(dòng)相乙腈和水應(yīng)該沒問題，兩者比例可以嘗試調(diào)整看看效果，檢測(cè)器如果有蒸發(fā)光散射檢測(cè)器就更好，因?yàn)槭静钫酃庖资墉h(huán)境溫度影響，另外，色譜柱，以前本人試過氨基柱也可以分開5種單糖，有稍微的拖尾現(xiàn)象，你可以考慮其它的糖柱，這方面得自己查不同色譜柱供應(yīng)商的資料。最后，在流動(dòng)相里面添加一些其它組分（如三乙胺），有可能有助于減少拖尾，這個(gè)我沒有把握。希望能幫助你。參考文獻(xiàn)：二醇基柱高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)法測(cè)定飲料中的糖。 |
6樓2013-04-08 08:43:49
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10樓2017-09-06 10:53:39
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