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yuuli新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求指導(dǎo)。〗湍傅腎GS1和IGS2段序列
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請問有人對酵母的IGS1和IGS2段序列測序過么?為什么我擴(kuò)增不出來。??好不容易可以看到亮帶,都是只有100bp左右的,完全不能測啊…………每個我都用過兩對引物,各種PCR體系試過了(IGS1段試過CNL12和CNS1,26SF和5SR;IGS2段試過NTS2和ETS,invSR1R和5SRNAR),都是從各種文獻(xiàn)上看的…… 請問有人知道我到底是哪里有問題么?是引物(到底該選哪種?)還是反應(yīng)條件(這個我真的試過好多遍),要么PCR后完全沒有亮帶,要么只有100bp左右的模糊亮帶(換PCR溫度只會使其亮一些或者暗一些,都是沒有辦法測序的)??? 由于我們實驗室只有細(xì)菌DNA提取試劑盒,所以我提DNA的時候用的是細(xì)菌,但是既然將DNA提出來了就都是DNA了吧,會是這個原因么?但是之前用同樣的DNA產(chǎn)物做18s和26s都很正常的? ![]() 有人做過么????help~~~~萬分感謝。。。! [ Last edited by yuuli on 2013-4-7 at 21:43 ] |
鐵蟲 (初入文壇)
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