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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 包涵體復性
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qinhuan0425新蟲 (初入文壇)
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[求助]
包涵體復性
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| 我要需要將包涵體變性，復性后掛鎳柱純化！我的蛋白大小是19KD左右，100ml菌液誘導表達后將沉淀溶于1ml緩沖液中，8M尿素變性，4度過夜，過夜后開始透析復性，問題一.1ml蛋白液加到透析袋中體積少嗎？透析袋外體積用多少的呢？透析袋用7KD的還是3KD的呢？二：透析復性的尿素濃度8M-6M-4M-2M-0這樣嗎？三：復性完后透析袋內蛋白液體積會增加嗎？ |
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| 第一個問題，1ml蛋白液可以透析，放在燒杯里透析即可，最好借助磁力攪拌4攝氏度條件下進行。至于透析袋的大小，根據(jù)目的蛋白的大小而定，理論上7kd的袋子可以用。第二個問題，沒做過。不敢多說，理論上你的方案可行。第三個問題，透析袋是選擇性半透膜，小分子可自由出入。體積會否增加要看你的透析袋內外的水勢。僅供參考 |
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qinhuan0425
2樓2013-04-09 10:33:26
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4樓2013-04-09 11:27:57
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樂樂3952
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8樓2013-04-09 18:15:41
steven9188
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9樓2013-04-11 09:01:57
qinhuan0425
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3Q!  |
10樓2013-04-11 09:28:51
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