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[求助]
葡萄糖苷酶的保存問題
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| 我購買的酶是50u/mg，所需的濃度是0.5u/ml，因為實驗室也沒有人做過酶方面的實驗，查閱文獻(xiàn)中只是涉及實驗步驟，鮮少提到實驗技巧方面的，所以一直都在摸索條件。一開始我是取1mg把其溶于10ml的容量瓶中，保存在4度冰箱中，每次用的時候取100ul稀釋十倍來用。可是做了一段時間之后，發(fā)現(xiàn)酶活性降低很多。經(jīng)過查閱資料，就將酶用ph 6.8的磷酸緩沖溶液配好（1mg溶于100ml），準(zhǔn)備放于-20度保存，我是在剛配好，分裝好（20min后），以及第二天從冰箱中拿出，測了其吸光值，三次吸光值分別是0.456, 0.372, 0.071，總之酶活性不斷降低。我也看了一些蛋白質(zhì)保存的方法，我想失活的原因在于，我保存時的濃度過低，沒有加保護(hù)劑，酶在低溫結(jié)構(gòu)被破壞了。因為酶還是有點貴的，我希望用過這種酶的各位同仁能幫幫忙，指點一下是如何保存的，萬分感謝！ |
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