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budian1989

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[交流] 酰胺鍵的表征

用EDC偶聯(lián)劑將量子點(diǎn)的羧基與氨基環(huán)糊精偶聯(lián)。有什么表征方法可以證明偶聯(lián)成功了。量子點(diǎn)濃度很低，，很難用有機(jī)溶劑沉降得到固體測(cè)紅外。。

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1樓 2013-04-15 12:46:50

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luohuayouyi

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budian1989: 金幣+1 2013-04-15 15:06:54

酰胺鍵因羰基和N的共軛也有紫外吸收的，雖然很弱，做個(gè)全波長(zhǎng)掃描看看最佳吸收波長(zhǎng)，大概220左右吧好像，然后HPLC吧。

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2樓2013-04-15 13:26:57

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budian1989

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2樓: Originally posted by luohuayouyi at 2013-04-15 13:26:57
酰胺鍵因羰基和N的共軛也有紫外吸收的，雖然很弱，做個(gè)全波長(zhǎng)掃描看看最佳吸收波長(zhǎng)，大概220左右吧好像，然后HPLC吧。

從300nm開(kāi)始紫外吸收的峰就很亂，鋸齒了。請(qǐng)問(wèn)hplc 怎么表征呢

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7樓2013-04-15 15:06:48

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zhazhayan

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為什么非要測(cè)固體呢，也可以用液體測(cè)紅外啊

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8樓2013-04-15 15:22:32

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budian1989

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8樓: Originally posted by zhazhayan at 2013-04-15 15:22:32
為什么非要測(cè)固體呢，也可以用液體測(cè)紅外啊

液體濃度太低了，測(cè)不出來(lái)

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9樓2013-04-15 15:32:36

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茅塞頓開(kāi)

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10樓2013-04-15 16:03:31

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luohuayouyi

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7樓: Originally posted by budian1989 at 2013-04-15 15:06:48
從300nm開(kāi)始紫外吸收的峰就很亂，鋸齒了。請(qǐng)問(wèn)hplc 怎么表征呢...

全掃描很雜說(shuō)明你的東西紫外吸收的結(jié)構(gòu)很多啊，你就做HPLC，把每個(gè)峰都接出來(lái)送質(zhì)譜，確認(rèn)分子量，看看哪個(gè)峰和目標(biāo)產(chǎn)物的分子量能對(duì)上，如果你的結(jié)構(gòu)沒(méi)有其他地方可以上酰胺鍵的話(huà)，那就可以說(shuō)明了，如果還有其它微點(diǎn)可以上酰胺，那樓主就得好好分析下或者提前保護(hù)基保護(hù)了。（也可以不接峰，直接送LC-MS，不過(guò)不如自己接出來(lái)好分析）

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13樓2013-04-15 17:14:35

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lethe120

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14樓2013-04-15 17:49:08

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13樓: Originally posted by luohuayouyi at 2013-04-15 17:14:35
全掃描很雜說(shuō)明你的東西紫外吸收的結(jié)構(gòu)很多啊，你就做HPLC，把每個(gè)峰都接出來(lái)送質(zhì)譜，確認(rèn)分子量，看看哪個(gè)峰和目標(biāo)產(chǎn)物的分子量能對(duì)上，如果你的結(jié)構(gòu)沒(méi)有其他地方可以上酰胺鍵的話(huà)，那就可以說(shuō)明了，如果還有其它 ...

紫外一般就看最大吸收吧，，也不一定說(shuō)吸收的結(jié)構(gòu)很多吧。。我們一般掃至300nm處，200-30nm處不穩(wěn)定

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15樓2013-04-15 18:19:09

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conanzzz

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LZ大概理解你說(shuō)量子點(diǎn)濃度低的問(wèn)題,個(gè)人覺(jué)得量子點(diǎn)偶聯(lián)物用色譜法去分析不太好辦,不如考慮下羧基量子點(diǎn)偶聯(lián)后的電荷變化,從DLS/Zeta電勢(shì)/瓊脂糖電泳之類(lèi)測(cè)下,另外你可以考慮下生物的檢測(cè)方法,比如針對(duì)環(huán)糊精的抗體或染色方法之類(lèi)的,再結(jié)合下吸收/熒光光譜法

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17樓2013-04-15 19:41:50

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luohuayouyi

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15樓: Originally posted by budian1989 at 2013-04-15 18:19:09
紫外一般就看最大吸收吧，，也不一定說(shuō)吸收的結(jié)構(gòu)很多吧。。我們一般掃至300nm處，200-30nm處不穩(wěn)定...

酰胺鍵吸收一般小于250nm，若只有酰胺鍵有吸收，則建議把波長(zhǎng)調(diào)小。若還有其他有吸收官能團(tuán)（苯環(huán)、共軛雙鍵神馬的）則找個(gè)吸收最好的波長(zhǎng)做就行，保證產(chǎn)物能被檢測(cè)到就行。

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18樓2013-04-15 19:48:20

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落花劍雨

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我覺(jué)得LC-MS應(yīng)該可以，算一下分子量

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19樓2013-04-15 22:25:29

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18樓: Originally posted by luohuayouyi at 2013-04-15 19:48:20
酰胺鍵吸收一般小于250nm，若只有酰胺鍵有吸收，則建議把波長(zhǎng)調(diào)小。若還有其他有吸收官能團(tuán)（苯環(huán)、共軛雙鍵神馬的）則找個(gè)吸收最好的波長(zhǎng)做就行，保證產(chǎn)物能被檢測(cè)到就行。...

我的產(chǎn)物主要吸收再500nm左右呢

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20樓2013-04-15 22:44:54

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19樓: Originally posted by 落花劍雨 at 2013-04-15 22:25:29
我覺(jué)得LC-MS應(yīng)該可以，算一下分子量

嘻嘻，，學(xué)院MS壞了。。。

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21樓2013-04-15 22:45:53

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luohuayouyi

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20樓: Originally posted by budian1989 at 2013-04-15 22:44:54
我的產(chǎn)物主要吸收再500nm左右呢...

只要你的目標(biāo)產(chǎn)物在500有吸收就行。

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22樓2013-04-16 09:02:11

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22樓: Originally posted by luohuayouyi at 2013-04-16 09:02:11
只要你的目標(biāo)產(chǎn)物在500有吸收就行。...

你的意思是目標(biāo)產(chǎn)物在500nm有吸收，，如果200nm左右還有另一吸收峰就表征有酰胺鍵的形成，，對(duì)吧？

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23樓2013-04-16 18:42:43

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jack2070

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其實(shí)EDC會(huì)引起嚴(yán)重聚集！~~~

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24樓2013-04-16 19:34:13

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23樓: Originally posted by budian1989 at 2013-04-16 18:42:43
你的意思是目標(biāo)產(chǎn)物在500nm有吸收，，如果200nm左右還有另一吸收峰就表征有酰胺鍵的形成，，對(duì)吧？...

不是，我的意思是，如果你能確定500nm處，你的目標(biāo)產(chǎn)物有吸收的話(huà)，就直接做500nm的HPLC就行，把可能是產(chǎn)物的峰接出來(lái)送質(zhì)譜，分子量符合就說(shuō)明對(duì)了。

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25樓2013-04-17 09:36:17

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xiaohu_515

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HNMR可以，如果有酰胺鍵，化學(xué)位移8點(diǎn)幾出峰

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26樓2013-04-17 19:03:26

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26樓: Originally posted by xiaohu_515 at 2013-04-17 19:03:26
HNMR可以，如果有酰胺鍵，化學(xué)位移8點(diǎn)幾出峰

謝謝�。�

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27樓2013-04-17 19:50:19

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17樓: Originally posted by conanzzz at 2013-04-15 19:41:50
LZ大概理解你說(shuō)量子點(diǎn)濃度低的問(wèn)題,個(gè)人覺(jué)得量子點(diǎn)偶聯(lián)物用色譜法去分析不太好辦,不如考慮下羧基量子點(diǎn)偶聯(lián)后的電荷變化,從DLS/Zeta電勢(shì)/瓊脂糖電泳之類(lèi)測(cè)下,另外你可以考慮下生物的檢測(cè)方法,比如針對(duì)環(huán)糊精的抗體或 ...

考慮過(guò)看Zeta電勢(shì)，，請(qǐng)問(wèn)是怎么做呢，，需要純化嗎？？

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28樓2013-04-17 19:52:19

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24樓: Originally posted by jack2070 at 2013-04-16 19:34:13
其實(shí)EDC會(huì)引起嚴(yán)重聚集！~~~

EDC 不是代表性的偶聯(lián)劑嗎，，不然用什么偶聯(lián)劑好呢

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29樓2013-04-17 19:53:34

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clarktao3樓

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黃山松505樓

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茅塞頓開(kāi)6樓

2013-04-15 14:29 回復(fù)

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祝福

fastseen11樓

2013-04-15 16:59 回復(fù)

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fastseen12樓

2013-04-15 16:59 回復(fù)

yingying158816樓

2013-04-15 18:19 回復(fù)

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haixiawu30樓

2013-04-21 00:25 回復(fù)

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