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瑩瑩陀zws

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【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

10樓: Originally posted by smallhorse88 at 2013-04-19 08:53:56
我一般是先把菌稀釋到我需要的濃度，比如10的六次方，在96孔板里面按照二倍稀釋法稀釋我的藥液，第一孔是200ul原液，2以后是逐漸稀釋的，然后每孔加100ul稀釋好的菌液，這樣的話不是藥液又被稀釋了么，菌液稀釋了么 ...

你可以這樣做，先把菌液在96孔板加好，再加你的藥液。每孔加200ul菌液，然后按照二倍稀釋法去加藥液

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悲傷著你的悲傷，幸福著你的幸福

11樓2013-04-19 19:05:54

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smallhorse88

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引用回帖:

9樓: Originally posted by 瑩瑩陀zws at 2013-04-18 18:38:55
先調(diào)菌液，藥液加入量按照最終濃度算，你自己都不確定加多少嗎...

我現(xiàn)在做的時候吧，先把藥液稀釋到需要的濃度，然后把菌液稀釋，再分別取100uL加到孔板里面，這樣的話，對于菌來講，是不是培養(yǎng)基太少了，會不會營養(yǎng)不夠，對結(jié)果造成影響啊...

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12樓2013-04-25 21:25:42

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carrieskl

木蟲 (著名寫手)

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking: 回帖置頂 2013-04-26 21:30:06
amisking: 金幣+5, MicEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 鼓勵積極發(fā)帖幫助解答問題。 2013-04-26 21:30:15

你是想在96孔板里培養(yǎng)然后到時間直接測嗎？我覺得不大靠譜誒。。
培養(yǎng)24小時，100ul的培養(yǎng)基很可能不夠。。
有的菌容易形成生物被膜，生物被膜在板底，測OD時會影響。。。
還有菌的量可能也會對耐藥有影響，比如10^6和10^4比，也許6次方的菌量大，會抱團生長，中間的菌就保護下來了，而4次方的也許就抱不成團。。。
還有就是，酶標儀測OD值只能反映菌的總數(shù)變化，活的死的都算在里面，你是只要菌總數(shù)嗎？
只是我的疑問，不確定。。

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爭做醫(yī)生中最好的廚子

13樓2013-04-25 23:24:26

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carrieskl

木蟲 (著名寫手)

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引用回帖:

11樓: Originally posted by 瑩瑩陀zws at 2013-04-19 19:05:54
你可以這樣做，先把菌液在96孔板加好，再加你的藥液。每孔加200ul菌液，然后按照二倍稀釋法去加藥液...

96孔板每孔容積一般在250-300ul左右，加液體頂多加到200ul不然很容易污染啊，搖勻時也容易灑。。。你說加200ul菌液再加藥液就盛不下了。

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爭做醫(yī)生中最好的廚子

14樓2013-04-26 00:01:39

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smallhorse88

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引用回帖:

13樓: Originally posted by carrieskl at 2013-04-25 23:24:26
你是想在96孔板里培養(yǎng)然后到時間直接測嗎？我覺得不大靠譜誒。。
培養(yǎng)24小時，100ul的培養(yǎng)基很可能不夠。。
有的菌容易形成生物被膜，生物被膜在板底，測OD時會影響。。。
還有菌的量可能也會對耐藥有影響，比如 ...

是呀，我們使用酶標儀直接測的呢...我就是不知道這樣做行不行呢

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15樓2013-04-26 16:42:18

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carrieskl

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【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

15樓: Originally posted by smallhorse88 at 2013-04-26 16:42:18
是呀，我們使用酶標儀直接測的呢...我就是不知道這樣做行不行呢...

還是要在管里培養(yǎng)再每個時刻取樣測OD
就是把菌液接種到培養(yǎng)基里（比如100ml）加藥然后搖勻分裝很多管每個時間點拿出一管測OD值

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爭做醫(yī)生中最好的廚子

16樓2013-04-26 17:00:36

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1935077860

新蟲 (初入文壇)

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【答案】應(yīng)助回帖

96孔板應(yīng)該每孔加菌量一定的，我做MIC時候都是一致才有意義啊

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17樓2015-07-07 22:46:17

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佳～佳

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【答案】應(yīng)助回帖

樓主你的實驗做出來了嗎最近我在做相似的請教一下研一的蟲子

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18樓2016-03-29 18:09:56

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卡卡羅特zxg

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引用回帖:

拿出來測od值不是會染菌嗎？那怎么繼續(xù)培養(yǎng)��？

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19樓2017-07-19 16:45:14

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