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急求進樣后HPLC柱壓升高的原因!!
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| 本人在做一個抗癌藥物的分析,發(fā)現(xiàn)進樣時進一針,柱壓便升高1~2MPa,分析條件是:diol二醇基色譜柱(非新柱子),流動相乙腈:水=92:8,流速1ml/min,柱溫30度,情況是這樣,之前柱子是正用,分析了幾天后柱壓增加顯著,有些堵了,由于實驗緊急,就先反過來用了。沖柱子的順序是進樣前純乙腈--70%乙腈---流動相(92%乙腈),反用后沖乙腈的柱壓是3.8mpa,沖70%乙腈是6.8mpa,92%乙腈是4.2.mpa,進樣后的柱壓情況是 進了一針柱壓變?yōu)?.2mpa,進了兩針變?yōu)?.7mpa,進了第三針就變成了10mpa,不敢進了,怕柱子反用也廢掉。這是為什么呢?1我的樣品是過膜后稀釋的,并且用流動相稀釋應該也不會出現(xiàn)進樣后晶體析出的現(xiàn)象,別人用這個機器的時候顯示正常,這是柱子自身的問題呢?還是我的操作哪里有不對的地方?請各位前輩多多指教,不勝感激!還想問一下,如果反用了柱子還能再正用嗎? |
金蟲 (著名寫手)
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