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huangmingli

鐵蟲(chóng) (初入文壇)

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[求助] 激光共聚焦染蛋白質(zhì)染料選擇？尼羅藍(lán)、尼羅紅還是FITC 已有1人參與

親們，我打算用激光共聚焦顯微鏡觀察下蛋白質(zhì)和多糖復(fù)合物的微觀結(jié)構(gòu)，查文獻(xiàn)說(shuō)只用尼羅藍(lán)就可以了，而且文獻(xiàn)上所用的蛋白質(zhì)和我的是一樣的，可是我按照他的方法沒(méi)有觀察到結(jié)果，作者的蛋白質(zhì)濃度是1%，我的是0.3%，我原以為可能是我的蛋白質(zhì)濃度太低�？墒墙裉炜葱∧鞠x(chóng)上帖子怎么說(shuō)染蛋白質(zhì)用FITC(異硫氰酸熒光素），我用的蛋白質(zhì)是酪蛋白酸鈉，求高手指點(diǎn)一二，呵呵，多謝多謝

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1樓 2013-04-17 16:22:39

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huangmingli

鐵蟲(chóng) (初入文壇)

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4樓: Originally posted by 非是非非2012 at 2013-05-17 10:43:57
不知道染多久，用多少染料，前些天頂了那三個(gè)東西到現(xiàn)在只有一個(gè)到了，等試劑中。打算先做個(gè)透射電鏡。不過(guò)我的樣品是會(huì)自發(fā)熒光的，之前去看過(guò)幾次，其實(shí)看到的都是葉綠素啦，所以要染色再看到多一點(diǎn)東西。樓主你 ...

好的好的互相幫助么呵呵

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5樓2013-05-18 09:53:50

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非是非非2012

鐵蟲(chóng) (初入文壇)

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【答案】應(yīng)助回帖

樓主，我也在做這個(gè)，我看文獻(xiàn)蛋白質(zhì)是用SYPROOrange染色，多糖用尼羅紅，離子區(qū)用FITC標(biāo)記的植物凝集素，這兩天打算開(kāi)始做了，發(fā)現(xiàn)各種問(wèn)題……

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2樓2013-05-15 16:59:56

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huangmingli

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2樓: Originally posted by 非是非非2012 at 2013-05-15 16:59:56
樓主，我也在做這個(gè)，我看文獻(xiàn)蛋白質(zhì)是用SYPROOrange染色，多糖用尼羅紅，離子區(qū)用FITC標(biāo)記的植物凝集素，這兩天打算開(kāi)始做了，發(fā)現(xiàn)各種問(wèn)題……

你發(fā)現(xiàn)什么問(wèn)題了呀？我覺(jué)得激光共聚焦不好做呀，之前做了兩個(gè)樣，用尼羅藍(lán)染的蛋白質(zhì)，沒(méi)有熒光現(xiàn)象，我染了20min,不知道是染得時(shí)間不夠還是別的原因，后來(lái)聽(tīng)?zhēng)熃阏f(shuō)應(yīng)該現(xiàn)在普通的熒光顯微鏡下看到熒光后再做激光共聚焦，這樣成功的概率大些，呵呵，祝我們好運(yùn)呀，我馬上又要重復(fù)了，呵呵。

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3樓2013-05-17 08:40:56

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非是非非2012

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【答案】應(yīng)助回帖

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3樓: Originally posted by huangmingli at 2013-05-17 08:40:56
你發(fā)現(xiàn)什么問(wèn)題了呀？我覺(jué)得激光共聚焦不好做呀，之前做了兩個(gè)樣，用尼羅藍(lán)染的蛋白質(zhì)，沒(méi)有熒光現(xiàn)象，我染了20min,不知道是染得時(shí)間不夠還是別的原因，后來(lái)聽(tīng)?zhēng)熃阏f(shuō)應(yīng)該現(xiàn)在普通的熒光顯微鏡下看到熒光后再做激光 ...

不知道染多久，用多少染料，前些天頂了那三個(gè)東西到現(xiàn)在只有一個(gè)到了，等試劑中。打算先做個(gè)透射電鏡。不過(guò)我的樣品是會(huì)自發(fā)熒光的，之前去看過(guò)幾次，其實(shí)看到的都是葉綠素啦，所以要染色再看到多一點(diǎn)東西。樓主你做成功了給我說(shuō)說(shuō)經(jīng)驗(yàn)哈！

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4樓2013-05-17 10:43:57

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普通表情龍兔虎貓

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