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永遠(yuǎn)不知道至尊木蟲 (著名寫手)
金花家族創(chuàng)始人
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[求助]
如何在總RNA上面連接上polyA尾巴呢？
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lxg133298
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2樓2013-04-27 17:24:29
禎噯溢誓
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3樓2013-04-27 17:28:13
4樓2013-04-27 18:06:27
永遠(yuǎn)不知道
至尊木蟲 (著名寫手)
金花家族創(chuàng)始人
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用這個(gè)就可以直接在植物總RNA上面加尾巴嗎？我可不是DNA上面加啊，你再確認(rèn)一遍 5樓2013-04-27 22:27:12
6樓2013-04-27 22:44:00
gyesang
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【答案】應(yīng)助回帖
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永遠(yuǎn)不知道: 金幣+5, 你能把方法告訴我嗎？ 2013-04-28 12:55:53
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永遠(yuǎn)不知道: 金幣+5, 你能把方法告訴我嗎？ 2013-04-28 12:55:53
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從miRNA的real time說(shuō)起吧， 用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)miRNA的表達(dá)，通常有兩種方法： 1 是莖環(huán)法 2 polyA加尾法 這里就涉及到如何在RNA上加polyA尾的問(wèn)題了，可以用 Poly A Polymerase這個(gè)酶，這個(gè)酶可以對(duì)RNA 3’端進(jìn)行合成“Poly A”尾，這個(gè)酶一般公司都有得買，樓主可以試試 如果樓主非要連接已經(jīng)合成好的polyA的話，只能試著用RNA ligase了 [ Last edited by gyesang on 2013-4-28 at 02:42 ] |
7樓2013-04-28 02:40:22
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9樓2013-04-28 18:42:05
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【答案】應(yīng)助回帖
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永遠(yuǎn)不知道(gyesang代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-04-29 14:01:55
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永遠(yuǎn)不知道(gyesang代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-04-29 14:01:55
| 我買的是AMBION的poly（a）聚合酶試劑盒，很好用，基本上每個(gè)RNA都可以加到200bp的a尾，但是感覺(jué)不便宜，貌似也有好多別的牌子的，我沒(méi)用過(guò)就不好說(shuō)了。官網(wǎng)地址https://products.appliedbiosyste ... e2&catID=603315 |
10樓2013-04-29 11:56:14
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