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圓二色譜 蛋白質(zhì)濃度
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| 我用圓二色譜測蛋白質(zhì)濃度，實(shí)驗(yàn)的師兄說蛋白濃度必須是0.1mg/ml，正負(fù)偏差0.01，我用BCA試劑盒、A280測的蛋白濃度，去了兩次，每次信號(hào)都很低，各位大神有用過圓二色譜測蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)的嗎？蛋白濃度真的要求那么嚴(yán)格嗎，必須0.1�。�！ |
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proteincd
新蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
| 要測到準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)CD譜， 要同時(shí)看一看吸收譜， 吸收值最好在 0.5-2.0 之間， 這是最主要的參照標(biāo)準(zhǔn)， 對(duì)濃度沒有必然的規(guī)定， 常見的經(jīng)驗(yàn)值為濃度在0.1-1.0 mg/ml 之間， 也可以更低或更高。 所以你先測一下紫外吸收值absorbance . 如果CD信號(hào)值太低， 可能需要提高它才能得到有合理信噪比的信號(hào)值。 如果你的buffer 背景吸收值不大， 也可以用大的光程如5mm , 10mm 的樣品池比色皿。 |
5樓2013-05-04 21:59:11
小鬼淺夏
銅蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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寒江雪0623(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，鼓勵(lì)應(yīng)助，分子生物版塊期待你的更多精彩。同樣期待你更詳細(xì)的應(yīng)助指導(dǎo)。 2013-05-02 12:02:16
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| 不是啊，濃度低測不到信號(hào)，濃度高，就會(huì)超過電壓，這個(gè)濃度可以根據(jù)自己圖的要求進(jìn)行調(diào)節(jié)，比如要求同樣的紫外吸收等。不知道你師兄要求0.1是因?yàn)槠渌麑?shí)驗(yàn)也用了這個(gè)濃度，所以要保持一致，還是？ |
2樓2013-05-02 08:26:54
3樓2013-05-02 11:10:47
lwiaanngg
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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4樓2013-05-03 09:23:55
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