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雙向第二向拖尾和底部花邊,求助
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15%膠,TCA/Ace沉淀蛋白。 1. 圖1和2都可以看到底部都成花邊了,不知是什么問題。膠是均勻的,膠板干凈。 2.圖2中進(jìn)入分離膠處有很多顆粒,并且縱向拖尾嚴(yán)重。橫向酸性端還有幾個(gè)點(diǎn),堿性端都是橫拖了,求解釋。聚焦不好么,那么為什么有酸性端有點(diǎn)? 2.jpg 1.jpg |
金蟲 (小有名氣)
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我感覺你的膠底下還是聚合的有點(diǎn)問題,調(diào)整一下AP和TEMED的含量,如果室溫高的話就少用一些AP,室溫低的話就稍微多用點(diǎn),聚合不能太快。 進(jìn)入膠有顆?赡苁悄闫胶獾臅r(shí)候沒弄好,平衡時(shí)間加DTT和IAA的時(shí)間20min就夠。 橫拖尾是聚焦的事,你樣品鹽離子應(yīng)該盡量的除去,還有DTT和IPG的含量不能太多。 還有就是你的ACR/BIS儲(chǔ)液,電泳液,都要過一遍濾膜,而且用過濾完的電泳液配封膠液。 暫時(shí)就想到這么多了 |
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