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chenhw06

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[交流] 有精通HPLC的蟲蟲嗎

有沒(méi)有對(duì)高效液相比較精通的親啊，接觸時(shí)間不長(zhǎng)，好多都不了解，有比較精通的蟲蟲給我個(gè)QQ吧，平時(shí)好請(qǐng)教啊。感謝�。。�！比如下面這個(gè)，我做的標(biāo)曲是在v=1的時(shí)候做的（C8，紫外，乙腈：水=2:1），結(jié)果跑出來(lái)峰（t=1.54，v=1）沒(méi)有分開，不知道怎么積分，后來(lái)把流速調(diào)低至0.7和0.5，感覺積出來(lái)的峰面積也不會(huì)準(zhǔn)，感覺把雜峰的面積也積進(jìn)去了。求QQ，求賜教！

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1樓 2013-05-02 16:27:07

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2樓: Originally posted by staffyujay at 2013-05-02 16:45:58
這么早出峰不是都和溶劑峰混在一起了，而且響應(yīng)也不高啊~這是溶劑峰吧。。。。

不是吧，保留就是比較弱的，之前測(cè)的標(biāo)樣就是出峰很快。。。

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3樓2013-05-02 16:49:56

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4樓: Originally posted by thankroc91 at 2013-05-02 16:58:31
響應(yīng)值很大，不知波長(zhǎng)多少？保留時(shí)間靠前考慮鹵素離子峰
這樣這能手動(dòng)積分，平行性看你自己功力了，
如果波長(zhǎng)合適，流動(dòng)相增加緩沖鹽。。調(diào)整至接近待測(cè)溶液PH或者緩沖鹽溶配

278nm，我的樣里面不含鹵素離子。后面的我就看不太懂了，

想問(wèn)問(wèn)0.5的那個(gè)算分開了嗎？流速為1的手動(dòng)積分有問(wèn)題嗎？

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5樓2013-05-02 17:03:43

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吃飯去了，蟲蟲們的幫幫忙嘛

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6樓2013-05-02 17:17:13

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7樓: Originally posted by swallow13 at 2013-05-02 17:38:12
液相方法有問(wèn)題五個(gè)峰之間沒(méi)有分開篩選一下方法吧

篩選方法。。。吐血了。。，是流速、溫度、流動(dòng)相這幾方面調(diào)試嗎？能不能給個(gè)QQ哪，假如不介意的話。

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8樓2013-05-02 18:35:34

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9樓: Originally posted by 餓到天明 at 2013-05-02 19:12:43
進(jìn)樣濃度太高了，峰都平頭了，你的儀器不能走梯度么？恒流分相近的雜質(zhì)沒(méi)有優(yōu)勢(shì)，峰又寬，分離度又不好。你可以把結(jié)構(gòu)式發(fā)出來(lái)看看。該用什么流動(dòng)相和柱子

可以走梯度，只是我沒(méi)有走過(guò)，液相剛買來(lái)沒(méi)太久，實(shí)驗(yàn)室的的都不是很懂。我的目標(biāo)物是第一個(gè)峰啊，濃度已經(jīng)很低了，查閱文獻(xiàn)都只是說(shuō)到用的是C8柱，具體條件沒(méi)有說(shuō)。前面兩個(gè)大峰應(yīng)該就是這兩個(gè)東西了，同分異構(gòu)體。

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10樓2013-05-02 19:49:13

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11樓: Originally posted by zly86 at 2013-05-02 20:58:21
保留太弱了，需要增加保留，將樣品峰和系統(tǒng)峰分開才能做定量結(jié)果，否則是不準(zhǔn)確的。
增加保留的方法：
1.降低流動(dòng)相中乙腈含量，你的乙腈含量太高（66.7%），試試從5%到50%乙腈，30分鐘的梯度，另外，建議不要用純 ...

好的，我明天做一個(gè)梯度試試去，不過(guò)我看的所有文獻(xiàn)都是C8，要改嗎？？

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12樓2013-05-02 21:06:09

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13樓: Originally posted by mayanshun at 2013-05-02 22:27:36
你的樣品極性很大，而分離模式是反相色譜，從而樣品幾乎沒(méi)有保留。流速改變效果不佳。建議：仍然采用C8，而流動(dòng)相中添加三氟乙酸或醋酸，抑制樣品的電離；或采用陰離子交換色譜模式分離分析。

大家意見都好不一樣哦，看來(lái)我要多嘗試幾次啦。謝謝哦~~

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14樓2013-05-02 23:32:29

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15樓: Originally posted by huihui2255365 at 2013-05-03 08:41:31
先把乙腈比例調(diào)小點(diǎn)吧~出峰時(shí)間晚點(diǎn)估計(jì)就能把峰分開~再不然有長(zhǎng)柱的話換根長(zhǎng)駐試試。。

在嘗試了，不知道可不可行呀

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16樓2013-05-03 10:33:19

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這個(gè)是用乙腈和水1：1做的，看是不是可以了？分的可以嗎?還要走梯度嗎？

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21樓2013-05-03 14:44:59

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20樓: Originally posted by liuhailong37 at 2013-05-03 11:50:14
建議調(diào)整色譜條件，流動(dòng)相比例，個(gè)人認(rèn)為最好換一下其他流動(dòng)相，調(diào)調(diào)ph試一下

看看我用乙腈和水1：1走的是不是可以？還需要繼續(xù)改條件優(yōu)化嗎？

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22樓2013-05-03 14:46:12

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19樓: Originally posted by govern1988 at 2013-05-03 11:24:10
然后再加添加劑，你這個(gè)化合物是酸性的，適當(dāng)加甲酸或者乙酸調(diào)節(jié)PH值

看看我用乙腈和水1：1走的是不是可以？還需要繼續(xù)改條件優(yōu)化嗎？下圖

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23樓2013-05-03 14:46:25

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17樓: Originally posted by 趙明東 at 2013-05-03 11:17:44
我的建議也是把溶劑比適當(dāng)?shù)母囊幌�，多試幾個(gè)不同的溶劑比。這種峰分不開，就是溶劑比不合適，保留時(shí)間集中在一起了。再不行再試其他的加緩沖溶液啥的。。

看看我用乙腈和水1：1走的是不是可以？還需要繼續(xù)改條件優(yōu)化嗎？見下圖

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24樓2013-05-03 14:46:37

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26樓: Originally posted by jixfeng at 2013-05-03 16:09:43
單位是AU哦很高了第一張都過(guò)載了...

那表示1：1可行？

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27樓2013-05-03 16:20:22

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28樓: Originally posted by jixfeng at 2013-05-03 16:20:23
加點(diǎn)鹽酸性的按百分比0.1~0.5% 加入 PH調(diào)節(jié)到3~5以下。試試你不覺得你的峰都不是很尖銳么，就是解離的原因。沒(méi)有全波長(zhǎng)掃描檢測(cè)器你又不走空白實(shí)在無(wú)法對(duì)你的圖譜進(jìn)行判斷。反正比你一開始的好了。...

有進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描啊，不過(guò)沒(méi)有把圖發(fā)上來(lái)，要看嗎？要看我去復(fù)制去？還有那個(gè)最大的峰是苯酚，我之前有拿標(biāo)品定性了，知道我要的峰出在什么位置，還要走空白嗎

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29樓2013-05-03 16:26:00

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32樓: Originally posted by zly86 at 2013-05-03 18:22:34
你就要看你的甄別能力了...

接觸液相不久啊，剛學(xué)會(huì)怎么操作，具體不怎么了解。文獻(xiàn)上也只是提到用的是C8柱，具體沒(méi)有提啊。唉。。。。。好煩

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33樓2013-05-03 18:45:14

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34樓: Originally posted by jixfeng at 2013-05-06 13:36:33
不知你現(xiàn)在的結(jié)果如何了其實(shí)大家的意見都是相似的你的條件不行連“湊活”都不行你把流動(dòng)相調(diào)到1:1后效果提高了很多（粗看可以湊活了） “貌似”各峰基線分離了但基線分離就是好的方法了？是否有峰沒(méi)有跑出 ...

我確實(shí)走的我的反應(yīng)液，我感覺我要的峰確實(shí)都已經(jīng)跑出來(lái)，就是分離度確實(shí)不是很好，可以問(wèn)一下，中控方法是什么意思嗎？不懂哪

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35樓2013-05-06 15:48:30

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