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porphybaby金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
冰上操作~~~還有關(guān)于PCR小管子的拿法~~
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我覺(jué)得冰上操作真是個(gè)很討厭的東西 特別是做RNA相關(guān)的 那些冰都會(huì)逐漸融掉的 而一開(kāi)始的話 那些冰塊之間又好像好多空隙 放PCR的管子插在上面 覺(jué)得根本就有些是沒(méi)接觸到的。。。 還有就是那些PCR小管啊 我想問(wèn) 怎么拿啊 比如你要加1 uL 或者 0.5 uL 那 你肯定會(huì) 從孔板上拿出來(lái)啊 應(yīng)該怎么拿才對(duì)呢 我已經(jīng) 反復(fù)噴那些 除RNAase的東西 還有 都注意了冰上操作 但還是P不出條帶啊。。。這是怎么回事。。。 其實(shí)是有的能出來(lái) 有的就出不來(lái)。。 |
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cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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你用的冰是用碎冰機(jī)做出來(lái)的嗎？如果是的話，應(yīng)該不會(huì)有很大空隙。如果冰塊比較大，可以加一些水做冰水浴，接觸效果比只用冰更好。 0.2ml的PCR管有專門(mén)的holder。沒(méi)有的話，可以用200μl的槍頭盒作為支架。加小量體積的液體不需要從冰上拿出來(lái)，做多了就習(xí)慣了。 很多樣品都是要冰上操作的，但如果你用的是hotstart的DNA聚合酶，混合時(shí)可以在室溫下。PCR做不出的原因很多，每一步做好對(duì)照，應(yīng)該可以確定問(wèn)題在哪里。 |
2樓2013-05-04 00:36:45
Fleaves
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porphybaby
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