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windleakey金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求一個(gè)Bamh1 EcorR1 爽酶切體系
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| 最近打算給我的目的基因換兩個(gè)載體,需要對(duì)原質(zhì)粒和新的兩個(gè)質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切(Bamh1 EcorR1),可酶切效率一直不高,做了兩次都很不成功,懷疑體系有問題,求一個(gè) 比較好用的的這兩個(gè)酶的雙酶切體系,謝謝了! |
金蟲 (正式寫手)
| 這個(gè)貌似和體系關(guān)系不是很大吧?首先測(cè)測(cè)你的載體濃度是多少,根據(jù)載體的濃度確定酶切載體的量,比如你的載體濃度<300ng/ul那就在40ul體系加入3-5ul的載體,如果>400加上2-3ul足夠了。酶加0.5ul,buffer4ul,其他水補(bǔ)平 |
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