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[求助]
稀釋梯度倒平板前鏡鑒
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| 為了能少做一些平板 導(dǎo)師說(shuō)在倒平板前對(duì)稀釋梯度做鏡鑒 看從哪個(gè)梯度開始做比較好 現(xiàn)在我不知道怎么鏡鑒 求大蟲們幫忙啊 我是微生物的菜鳥 希望能指導(dǎo)一下我 我做的是泡菜中微生物的分離 |
木蟲 (著名寫手)

木蟲 (著名寫手)
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其實(shí)你可以查查文獻(xiàn),你的那株菌不同濃度時(shí)的OD值,然后測(cè)OD就能大概估一下了。。。 如果一直用這株菌完全可以趁不忙的時(shí)候倒些平板做個(gè)活菌數(shù)-OD的標(biāo)準(zhǔn)曲線,后續(xù)實(shí)驗(yàn)都可以省很多事兒,畢竟每次都涂片計(jì)數(shù)太麻煩了。。。。你又看不出哪個(gè)是活的哪個(gè)是死的,只能得到個(gè)總菌數(shù)。 以大腸桿菌為例說(shuō)個(gè)鏡檢計(jì)數(shù)的方法 ------ 直接涂片計(jì)數(shù)法。用測(cè)微器測(cè)出油鏡的視野半徑γ, 然后計(jì)算視野的面積。 涂片的制作: 以滅菌微量吸管吸取充分混合的被測(cè)菌液0.01ml,滴加于清潔的劃有100mm2方格的載玻片上。將玻片標(biāo)本固定,以堿性美藍(lán)染色5min,水洗干燥后即可鏡檢。 鏡檢和計(jì)數(shù): 將涂片置于已測(cè)知視野面積的油鏡下觀察,檢查x個(gè)視野(按菌數(shù)決定),計(jì)算每個(gè)視野中所見的細(xì)菌數(shù),假設(shè)其總數(shù)為n,則平均每視野具有n/x個(gè)細(xì)菌,故1ml被檢菌液中的細(xì)菌總數(shù)=100×100mm2 πr2×nx |

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