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[求助]
基因克隆表達ORF長短的問題
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本人最近通過同源克隆的方法得到一條序列，經(jīng)過ORF分析，發(fā)現(xiàn)了3條ORF，他們具有同樣的終止子位點，ORF-1比ORF-2長54bp，ORF-3更短。將3個ORF都構(gòu)建了載體（pUC19），進行了外源的定性的一個表達，結(jié)果ORF-1，ORF-2都出現(xiàn)了預(yù)期的表型，也就是說含有我要的基因，ORF-3完全沒有出現(xiàn)預(yù)期的表型，ORF-2的表型比ORF-1明顯。 我自己分析覺得：ORF-2即為我要的基因的開放閱讀框，表達了具有活性的蛋白，ORF-1表達出來的蛋白可能包含ORF-2表達蛋白的活性部位，所以也有相應(yīng)的活性，但要弱于準(zhǔn)確的活性蛋白，所以表型上要差一點。 不知道這樣理解對不對，請大家?guī)臀铱纯�，謝謝了。 |
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