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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 肽 離子交換 分離
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肽 離子交換 分離
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本人從大米蛋白水解產(chǎn)物中分離多肽（或小肽），先用凝膠過濾，然后用陰離子交換（DEAE-sphacrose-FF）�？戳艘恍┪墨I，平衡液pH值（也就是洗脫液和肽溶解液）差別很大，有的用4.5，有的8.5，有的直接用去離子水（中性）。 問題：陰離子交換色譜，應該讓肽帶上負電，pH高于肽等電點時才帶負電。一般用多高的pH溶解和洗脫�。恐x謝 |
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
njcj(gyesang代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵回帖應助！ 2013-05-10 22:48:23
njcj: 金幣+3, ★★★很有幫助, 謝謝！ 2013-05-11 17:56:21
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從你的述說衷，可以確定：這個肽的PI值應該是小于4.5的吧？？ 溶解？什么意思？溶解蛋白嗎？如果是的話，pH當然是與你的Elution buffer 保持一致! 多高的pH較合適？這個沒有辦法回答你，每個蛋白掛離子柱的能力，在不同的pH條件下，掛柱的能力是不一樣的！ 最佳的pH需要你自己摸索！你可以拉梯度來確定！ 我建議：因為你過陰離子柱，可以考慮選擇用tris作緩沖，pH可以選擇8.0 。因為tris的緩沖范圍較大，且對蛋白穩(wěn)定性較好。在pH8.0左右緩沖能力最強，可以先試試！ |
2樓2013-05-10 18:56:38
mitocam
新蟲 (正式寫手)
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3樓2013-05-10 20:21:20
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