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木槿飄揚新蟲 (小有名氣)
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[求助]
兩種小分子量、弱極性物質(zhì)怎么分開
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| 是用二氯甲烷萃取的東西，極性較弱，點板兩種物質(zhì)遷移率相近，之前過了硅膠柱，但是總是有色素跟著晶體，想把色素給除掉，現(xiàn)在過了Sephadex LH-20，用甲醇-二氯甲烷1:3洗脫，但還是沒怎么分開。而且過柱子的時候，100ml的柱體積，大概30ml的時候就能出東西了，不到一個柱體積連色素也洗脫下來了，兩種物質(zhì)總是緊跟在一起。有沒有什么好的辦法可以把它們分開？ |
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你沒有搞清楚LH-20的分離原理，他基本上是基于分子塞在你用的流動（甲醇-二氯甲烷1:3），你的東西如果甲醇的溶解性還行的話，你可以用這個LH-20介質(zhì)，用甲醇水洗脫下，在這種流動相條件下，這種介質(zhì)主要還是靠分子塞，還有一點反向的原理。LH-20除去色素一般都是國內(nèi)文獻里寫的，我認(rèn)為基本不靠譜。要想把這兩種東西分開，既然你用了硅膠分過了，你可以用反向?qū)游鰳渲琒KP-10-4300分下，這樣你用正向+反向應(yīng)該可以分開了。 如果你的兩種東西是同分異構(gòu)體，或者存在手性那就得用其他辦法，比如10um的反向硅膠 或者手性填料了 |
3樓2013-05-11 19:44:16
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