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[求助] 膠乳偶聯(lián)出現(xiàn)沉淀，請(qǐng)高手指點(diǎn)

我的羧基聚苯乙烯膠乳微球用EDC偶聯(lián)抗體，當(dāng)時(shí)沒(méi)有出現(xiàn)沉淀，但隔夜后出現(xiàn)沉淀是什么原因？而且隨著加入抗體量的增加，沉淀量也增多？覺(jué)得匪夷所思。請(qǐng)高手們幫忙分析下。

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不管夢(mèng)想有多遠(yuǎn)，不停地走下去

1樓 2013-05-14 09:16:40

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【答案】應(yīng)助回帖

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皮皮1871: 金幣+2, ★有幫助 2013-05-20 09:17:41

是不是抗體加入偶聯(lián)Buffer后由于pH、離子強(qiáng)度的變化造成蛋白沉淀了？

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2樓2013-05-16 10:34:15

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是不是抗體加入偶聯(lián)Buffer后由于pH、離子強(qiáng)度的變化造成蛋白沉淀了？

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3樓2013-05-16 10:34:32

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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
皮皮1871: 金幣+8, ★★★很有幫助 2013-05-20 09:17:27

是羧基聚苯乙烯膠乳微球發(fā)生了自偶聯(lián)，建議：
1.減低EDC含量
2.改變緩沖體系
3.調(diào)整羧基聚苯乙烯膠乳微球、EDC、抗體偶聯(lián)時(shí)間
4.調(diào)整離心速度

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4樓2013-05-17 08:43:14

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引用回帖:

4樓: Originally posted by 159236478 at 2013-05-17 08:43:14
是羧基聚苯乙烯膠乳微球發(fā)生了自偶聯(lián)，建議：
1.減低EDC含量
2.改變緩沖體系
3.調(diào)整羧基聚苯乙烯膠乳微球、EDC、抗體偶聯(lián)時(shí)間
4.調(diào)整離心速度

請(qǐng)問(wèn)離心速度是應(yīng)降低還是升高呢？

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不管夢(mèng)想有多遠(yuǎn)，不停地走下去

5樓2013-05-20 09:18:44

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降低，速度越低，乳膠顆粒發(fā)生個(gè)體碰撞的機(jī)會(huì)越少！

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6樓2013-05-21 14:06:53

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哥，你的抗體多了，其它因素不變，降低抗體濃度。
這個(gè)正常，多余的抗體自己和自己雜交形成“多聚體”沉淀下來(lái)了。

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7樓2013-07-15 10:12:01

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問(wèn)題解決了嗎，怎么處理的，謝謝！

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8樓2014-04-21 09:11:30

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你當(dāng)時(shí)問(wèn)題解決沒(méi)？

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9樓2014-11-19 12:42:14

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請(qǐng)問(wèn)大神，你出現(xiàn)的這個(gè)問(wèn)題解決沒(méi)？我現(xiàn)在也遇到了同樣的問(wèn)題，望大神指點(diǎn)。

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10樓2016-01-13 13:31:10

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