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20083630zhan木蟲 (正式寫手)
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[求助]
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
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最近幾天一直在做轉(zhuǎn)化,第一天下午涂板,第二天晚上10點(diǎn)多才能長出來,用牙簽挑取單菌落,菌P,然后把牙簽在盛有LB+AMP的液體培養(yǎng)基的1.5mlEP管中涮一下,37°培養(yǎng),菌P顯示有目的條帶,然后把對應(yīng)的EP管中的菌液加入到培養(yǎng)瓶中(LB+AMP)培養(yǎng),菌體長得很慢,并且,再次提取質(zhì)粒酶切,沒有目的條帶,不知道什么原因,請各位大神指教啊 |
木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
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多半是污染, 樓主用PCR檢查一下?lián)u出來的菌液. 至于為什么頭一天可以做出PCR, 我猜原因是你用的引物P出了殘留在LB板上的模板. |
金蟲 (正式寫手)

木蟲 (正式寫手)
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