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Arsene_Lupin銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
耐鹽堿菌全蛋白跑2D
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最近在學(xué)習(xí)雙向電泳技術(shù)，幫老師跑蛋白。最近拿到一株耐鹽堿菌株，提取總蛋白后跑2D（GE），3-10，18cm膠條，正常電聚焦后膠條不是應(yīng)該從溴酚藍(lán)色變成無色么，可是這幾個(gè)樣陽性端是無色，陰性端還是藍(lán)色，且膠條厚度明顯看出藍(lán)色端厚于白色端，老師的幾個(gè)樣品完全變成無色。請教各位蟲友可能的原因及解決之道。（此菌之前培養(yǎng)條件是10%Nacl，pH10） [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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7樓2013-05-19 03:12:40
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這就是問題所在了，我提的是總蛋白，雖說耐鹽菌會(huì)有些pI很高的蛋白但不至于一個(gè)點(diǎn)都沒有吧，正常蛋白是不是也可以在膠條上分開？如果一些蛋白pI很高，超過膠條范圍，不也應(yīng)該跑到膠條的端點(diǎn)么？二向反映出來在端位會(huì)有大片縱帶吧？這個(gè)樣品濃度不高，不超過10，我按500ug／ml上樣，考染后銀染一點(diǎn)反映沒有。因?yàn)樾枰_(dá)到500的濃度，所以350體系的話水化液的量會(huì)很少，我在想會(huì)不會(huì)水化不完全的關(guān)系？ [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
8樓2013-05-19 05:21:10
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9樓2013-05-19 12:16:27
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10樓2013-05-19 20:51:01
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