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前脂肪細(xì)胞傳代后狀態(tài)不佳
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大家好，最近我在養(yǎng)前脂肪細(xì)胞。將原代細(xì)胞傳代時(shí)，第二天細(xì)胞貼得比較多，等2到3天后新的細(xì)胞基本能鋪滿瓶子，于是再進(jìn)行傳代，第二天發(fā)現(xiàn)細(xì)胞貼壁比較少，這次細(xì)胞明顯沒有第一次傳代后細(xì)胞長的快，確定細(xì)胞沒有污染。不知道是什么原因。請大俠幫忙分析一下。以下是幾點(diǎn)說明： 1. 方法：加入胰酶消化細(xì)胞成單個(gè)時(shí)，吸走胰酶，加入培養(yǎng)基將細(xì)胞沖洗下來，然后分裝（1：2），原來的瓶子里的細(xì)胞生長稍好一些。 2.傳代后首次換液：一般是24小時(shí)內(nèi)換液。 3.第二次傳代前，原來的細(xì)胞鋪滿了至少90%，消化，吹打后，接種到新的瓶子，當(dāng)時(shí)明明看到瓶子里有很多圓形的細(xì)胞的，但是第二天去看發(fā)現(xiàn)貼壁的細(xì)胞很少，而且培養(yǎng)基中漂浮的細(xì)胞也不多，請問這是怎么回事呢？ 4. 還有一個(gè)問題就是，第二次傳代后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了一些變化。以前基本都是梭形，傳代2次后發(fā)現(xiàn)有一些多角形的細(xì)胞出現(xiàn)，當(dāng)然也有少量細(xì)胞分化（有小脂滴），難道脂肪細(xì)胞不適合大量傳代？ 請高手們指點(diǎn)迷津哦，謝謝。 |
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3樓2013-05-24 22:44:47
10樓2013-05-25 00:36:27
mlanqiang
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14樓2013-05-25 08:10:04
15樓2013-05-25 10:11:07
userhung
禁蟲 (文學(xué)泰斗)
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16樓2013-06-01 06:52:14
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2013-05-24 22:20
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bwshanxi4樓
2013-05-24 22:49
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2013-05-24 22:50
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2013-05-24 22:52
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myprayer: 金幣-1, 請勿類似單純表情回復(fù)。。。下不為例，謝謝合作。這種需要求助幫忙的帖子還是多給點(diǎn)實(shí)際的可行的意見呀。 2013-05-30 10:26:07
祝福
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天涯20127樓
2013-05-24 22:56
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gzl99018樓
2013-05-24 23:20
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祝福祝福祝福祝福祝福祝福！
2013-05-25 00:18
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失落的豇豆11樓
2013-05-25 00:38
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clarktao12樓
2013-05-25 00:52
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userhung13樓
2013-05-25 07:30
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