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zd0017鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
求指導(dǎo)！��！分子生物學(xué)大牛請(qǐng)進(jìn)！�。�！
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| 我從pEGFP-C3載體上把neo抗性基因擴(kuò)下來(lái)連到pMD18-T載體上后，轉(zhuǎn)DH5α，轉(zhuǎn)化子在amp和km抗性的板上都長(zhǎng)了克隆，就是neo抗性的板上沒(méi)有長(zhǎng)克隆，不知道為什么？？？跪求指導(dǎo)，還是我該用G418篩選�。。�！非常感謝�。�！ |
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酶切專家
金蟲(chóng) (小有名氣)
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4樓2013-05-30 21:04:17
cyu1987
新蟲(chóng) (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zd0017(myprayer代發(fā)): 金幣+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-30 18:51:18
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| 確定引物沒(méi)問(wèn)題么？PCR是否突變了？是否移碼？ 把你AMP和KM板上的菌落去測(cè)序看看。既然是抗性篩選，沒(méi)長(zhǎng)出來(lái)多半是你連上去的抗性片段有問(wèn)題。 |
2樓2013-05-30 17:22:07
zd0017
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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3樓2013-05-30 20:50:47
zd0017
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5樓2013-05-31 09:48:03
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