 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 826 | 回復(fù): 5 | |||
[交流]
一道非�？蓟竟Φ念}。
|
|
在某主頁上看見一堆分子生物學(xué)的題，好考基本功啊！ 這題看了答案也沒想明白，各位看看題討論討論。 It is possible to obtain mutations in plasmid encoded genes by mutagenizing the purified plasmid DNA in vitro (for example, with hydroxylamine) then transforming the plasmid DNA into recipient cells. Given a plasmid that encodes ampicillin resistance (AmpR), chloramphenicol resistance (CamR), and B-galactosidase (lacZ), how would you use this approach to isolate single mutations in the lacZ gene? Be sure to describe any genetic selections and/or screens used. [Hint: you will need a way of measuring the relative amount of mutagenesis to ensure a reasonable probability that the lacZ mutants are due to a single mutation.] ANSWER: Mutagenize the purified plasmid DNA in vitro with hydroxylamine. Move the plasmid into a lacI- lacZ+ lacY+ host (by transformation or electroporation of the plasmid DNA), selecting for chloramphenicol resistance. Screen the cells for (i) AmpR and (ii) repression of lacZ (for example, by screening for X-gal- in the absence of an inducer such as lactose or IPTG). In several independent experiments, quantitate the extent of mutagenesis by plotting the number of Amps mutants and the number of LacI- mutants vs time of exposure to the mutagen. The results will indicate the number of cells that have a mutation in both genes (i.e. at least two hits) compared to the number of cells that have a mutation in only one gene (i.e. at least one hit). These results can be plugged into the Poisson distribution to determine the probability of 0, 1, and >1 hit per gene for each time point. Choose colonies from time points where the probability of >1 hit per gene is rare. [ Last edited by 1949stone on 2013-6-6 at 08:08 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有155人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 你不得不知道的托�？荚嚒皾撘�(guī)則”
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 考研福利！ 2014考研數(shù)學(xué)必看 張宇各種答疑解惑！
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 名校碩士生談考研捷徑【轉(zhuǎn)】
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【轉(zhuǎn)載】（轉(zhuǎn)載）面試86.4，姐我終于上岸啦~~~小三翻盤！
已經(jīng)有27人回復(fù)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
【招聘】溫州醫(yī)科大學(xué)/附屬醫(yī)院/甌江實驗室李校堃院士團(tuán)隊誠聘博士后和科研人員
+1/192
-
湖北大學(xué)陳苗苗教授食品安全研究團(tuán)隊誠招博士生
+1/183
-
中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所張旭志課題組招聘 柔性傳感器研究 科研助理
+2/142
-
求助有機(jī)化學(xué)第二版陸陽申東升主編課件或者電子版書籍
+1/84
-
中山大學(xué)附屬醫(yī)院實驗和生信科研助理招聘
+1/79
-
沈陽工業(yè)大學(xué)-環(huán)境電化學(xué)技術(shù)研究團(tuán)隊-招收碩士研究生
+3/57
-
濟(jì)南大學(xué)水利與環(huán)境學(xué)院趙艷俠簡介
+1/46
-
階段性壓力
+2/40
-
沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)生物與醫(yī)藥專碩招收調(diào)劑生�。。。。。。。。。�
+1/37
-
煙臺大學(xué)精準(zhǔn)材料高等研究院26年材料方向研究生招生
+1/32
-
南京林業(yè)大學(xué)木質(zhì)纖維素功能材料國際聯(lián)合創(chuàng)新中心招收2026級碩士生（調(diào)劑）
+2/20
-
博士科研人員（化學(xué)過程工藝與硬件系統(tǒng)工程）
+1/12
-
中國地震局地質(zhì)研究所+地球物理專業(yè)+接收調(diào)劑
+1/11
-
蘇州初創(chuàng)公司誠聘化學(xué)過程工藝與硬件系統(tǒng)工程師
+1/10
-
博士招生 | 青島科技大學(xué)（高分子、化學(xué)、材料、力學(xué)、機(jī)電工程、計算機(jī)仿真）
+1/9
-
江蘇科技大學(xué)機(jī)械工程學(xué)院海洋裝備仿生課題組招生簡介
+1/5
-
廣東唯一石化院�！Y源與環(huán)境專碩招生
+1/5
-
武漢理工大學(xué)船海與能源動力工程學(xué)院劉鵬飛院士團(tuán)隊博士后招聘啟事
+1/4
-
上海師范大學(xué)有機(jī)化學(xué)專業(yè)研究生招生
+1/2
-
香港中文大學(xué) 生物醫(yī)學(xué)學(xué)院/組織工程與再生醫(yī)學(xué)研究所 招聘博士后/研究助理
+1/2
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2013-06-06 11:38:11
3樓2013-06-06 12:00:16
4樓2013-06-06 22:59:16
5樓2013-06-07 10:48:57
6樓2013-06-07 12:15:15
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 kikiwitch 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | Micky11223 2026-03-25 | 13/650 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +4 | 宋明欣 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑，各位老師看看我�。�！ +5 | 祁祺祺 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +13 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-25 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +10 | 你好明天你好 2026-03-23 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 339求調(diào)劑 +4 | 烤麥芽 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +9 | 小蠟新筆 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +5 | .m.. 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[碩博家園] 北京林業(yè)大學(xué)碩導(dǎo)招生廣告 +6 | kongweilin 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑。有半年電池和半年高分子實習(xí)經(jīng)歷 +10 | 材料學(xué)257求調(diào)劑 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研]
材料學(xué)碩，求調(diào)劑
6+5
|
糖葫蘆888ll 2026-03-22 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +4 | 贈我一本書 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | Auroracx 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +6 | 紅衣隱官 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 081700 調(diào)劑 267分 +11 | 迷人的哈哈 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +6 | 藍(lán)山月 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +4 | 錦衣衛(wèi)藤椒 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)071000，求調(diào)劑 +4 | 沿岸有貝殼6 2026-03-21 | 4/200 |
|