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yaowang1991鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
NUNC maxisorp 96孔板技術求助
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各位大俠： 小弟最近在做ELISA，想把一種糖包被在96孔板上，然后加一抗和酶標二抗顯色�，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)我用BSA（全組分）對板進行封閉，不加一抗，只加酶標二抗（是抗His的HRP標記的抗體），顯色以后OD值竟然超過了檢測上限。我增加BSA封閉液的濃度從0.5%依次遞增到20%。顯色基本上是一樣的。這說明我的酶標二抗發(fā)生了很強的非特異性吸附，或者說BSA沒有把板子封閉上。我用的是NUNC的Maxisorp表面的高吸附板。是原文的作者推薦的 ，他說他也是用的這種。我不知道究竟是什么問題？ 理論上說酶標二抗在封閉做的很完全的情況下是不應該有這么高的背景的。但是我又不知道我的BSA都增加到20%了為什么還封不上？難道是BSA應該用V組分而不是全組分？ 請高手不吝賜教。 |
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2樓2013-06-14 14:55:28
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