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lp147057101銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
戊二醛連NH2-DNA
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| 我用APTES和DMOAP硅烷化玻片，然后在玻片上修飾了戊二醛，最后再連接氨基鏈，放置過(guò)夜都接不上，不知道是怎么回事，求指導(dǎo) |
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guisiliao
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【答案】應(yīng)助回帖
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release53: 金幣+1, 感謝應(yīng)助 2013-11-04 11:12:40
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干擾還好吧，首先在硅烷化之前先用濃硫酸和過(guò)氧化氫洗，形成一個(gè)親水層，再來(lái)硅烷化修飾，效果會(huì)好一點(diǎn)，再用PB稀釋的戊二醛浸泡2H左右就可以了，然后用大量超純水沖洗，對(duì)了，在硅烷化修飾后還需要一個(gè)步驟，就是放入烘箱中烘30min，110度，這步是為了硅烷接合得更加牢靠。 接氨基DNA，我們都是在37度的濕盒中放置2H左右的，4度放置過(guò)夜也試過(guò)，效果差不多。 |
6樓2013-06-20 14:35:40
zp199
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
crity328: 金幣+1, 感謝交流，歡迎常來(lái)~ 2013-06-14 14:29:28
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| 不知道LZ為啥要用DMOAP？DMOAP的全稱是不是二甲基十八烷基[3-(三甲氧基硅基)丙基]氯化銨？如果是的話，那么你的這個(gè)體系很有問(wèn)題，APTES的烷基鏈比DMOAP的烷基鏈短太多了，即使戊二醛和APTES的氨基發(fā)生了反應(yīng)，使得末端修飾為醛基，但是由于空間位阻太大的原因，DNA沒(méi)法和醛基反應(yīng)。我建議你直接用APTES修飾玻片就行了，不要用DMOAP。 |
2樓2013-06-13 14:26:33
guisiliao
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8樓2013-11-04 07:55:11
lp147057101
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3樓2013-06-14 10:04:54
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4樓2013-06-17 09:29:21
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5樓2013-06-20 09:07:05
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7樓2013-11-02 22:03:30
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9樓2013-11-04 19:47:55
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http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=6005232&fpage=1我也在做這個(gè)實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)問(wèn)你修飾完戊二醛后，玻片吹干后是透明的嗎？我的怎么一用氮?dú)獯蹈删筒煌该髁四�？像一層不均勻的薄膜，之前APTES后都是透明的。請(qǐng)指教。 |
10樓2014-03-06 18:48:23
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