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xuzhe2240銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
鎳柱再生問(wèn)題
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由于鎳柱使用比較久了，平時(shí)也只是一般再生，并沒(méi)有徹底再生過(guò)。近期填料有點(diǎn)變成棕灰色了，想徹底再生一下，請(qǐng)問(wèn)一下，徹底再生時(shí)，第一步需要使用再生緩沖液6M Gu-HCl，0.2M醋酸，但是實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有鹽酸胍，不知道可不可以使用其他東西代替。 第 步1 2倍體積再生緩沖液（6M Gu-HCl，0.2M醋酸） 第 步2 5倍體積水 第 步3 3倍體積2% SDS 第 步4 1倍體積25%乙醇 第 步5 1倍體積50%乙醇 第 步6 1倍體積75%乙醇 第 步7 5倍體積100%乙醇 第 步8 1倍體積75%乙醇 第 步9 1倍體積50%乙醇 第 步 10 1倍體積25%乙醇 第 步 11 1倍體積水 第 步 12 5倍體積100mM EDTA，pH8.0 第 步 13 10倍體積水 第 步 14 2倍體積100mM NiSO 4 第 步 15 2倍體積水 第 步 16 2倍體積再生緩沖液 第 步 17 2倍體積適合的緩沖液平衡（例如1×Ni-NTA結(jié)合緩沖液，buffer A或buffer B） 這是說(shuō)明書(shū)上的再生方法，不知道用到鹽酸胍的那兩步能不能用其他東西代替 [ Last edited by 1949stone on 2013-6-14 at 08:24 ] |
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cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 沒(méi)用過(guò)鹽酸胍。我是用2%的SDS洗，然后再用梯度乙醇洗。徹底去掉鎳離子可以用100mM EDTA洗脫后重新裝。 |
2樓2013-06-13 10:59:35
xuzhe2240
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1949stone: 按照說(shuō)明書(shū)一般不會(huì)有他太大問(wèn)題 你可以問(wèn)問(wèn)供應(yīng)商 2013-06-14 08:24:37
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第 步1 2倍體積再生緩沖液（6M Gu-HCl，0.2M醋酸） 第 步2 5倍體積水 第 步3 3倍體積2% SDS 第 步4 1倍體積25%乙醇 第 步5 1倍體積50%乙醇 第 步6 1倍體積75%乙醇 第 步7 5倍體積100%乙醇 第 步8 1倍體積75%乙醇 第 步9 1倍體積50%乙醇 第 步 10 1倍體積25%乙醇 第 步 11 1倍體積水 第 步 12 5倍體積100mM EDTA，pH8.0 第 步 13 10倍體積水 第 步 14 2倍體積100mM NiSO 4 第 步 15 2倍體積水 第 步 16 2倍體積再生緩沖液 第 步 17 2倍體積適合的緩沖液平衡（例如1×Ni-NTA結(jié)合緩沖液，buffer A或buffer B） 這是說(shuō)明書(shū)上的再生方法，不知道用到鹽酸胍的那兩步能不能用其他東西代替 |
3樓2013-06-13 11:08:42
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4樓2013-06-13 11:30:09
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