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ranranxing金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
3‘RACE實(shí)驗(yàn)好不好做
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| 分子生物學(xué)新手，實(shí)驗(yàn)方案里計(jì)劃通過(guò)3’RACE實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證基因是否表達(dá)以及查找表達(dá)的基因�？次墨I(xiàn)里面也是通過(guò)這種方法做的，但是今天去找導(dǎo)師，聽(tīng)說(shuō)之前有位師姐做3‘RACE做了好幾年到畢業(yè)也沒(méi)做出來(lái)。實(shí)驗(yàn)室之前沒(méi)有人做過(guò)ＲＡＣＥ，我自己也沒(méi)有分子生物學(xué)背景，擔(dān)心在實(shí)驗(yàn)技術(shù)層面出問(wèn)題。在此請(qǐng)教各位做過(guò)ＲＡＣＥ的前輩，３’ＲＡＣＥ實(shí)驗(yàn)好不好做，各位都是用的那家公司的試劑盒呢，有沒(méi)有特別需要注意的事項(xiàng)，大家是多長(zhǎng)時(shí)間做完的。萬(wàn)分感激～ |
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myprayer: 金幣+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-21 13:54:13
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clontech做起來(lái)還是蠻快的，不容易出結(jié)果，你最好找一個(gè)專業(yè)的人指導(dǎo)你做，自己做，不管原理都弄不清楚，還會(huì)出現(xiàn)各種問(wèn)題，并且做一次也不便宜~~~ 希望可以幫到你，實(shí)驗(yàn)順利~~ ps：驗(yàn)證基因是否表達(dá)以及查找表達(dá)的基因，為什么非要用race呢，直接定量不久完了嗎？疑惑中~~~呵呵 |
4樓2013-06-20 22:42:42
niil
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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你這種情況，那還是先確定有這個(gè)基因，并且獲得了部分的基因序列之后再做RACE才好點(diǎn)。 可以先分析下這種酶的同源基因，序列比對(duì)后，設(shè)計(jì)保守引物或者簡(jiǎn)并引物進(jìn)行同源克隆，獲得部分的cDNA片段之后分析正確了再進(jìn)行RACE。 沒(méi)有確定的基因序列，直接做RACE還是很困難的。 實(shí)驗(yàn)總有枯燥的一面，但是也有成功的欣喜，需要精心下來(lái)，一步一個(gè)腳印的去設(shè)計(jì)分析，樓主加油！ |
6樓2013-06-21 11:29:09
Fleaves
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1949stone: 不用盲目抵制啊 他家的東西 還不錯(cuò)啊 2013-06-20 08:28:16
1949stone: 金幣+1, 忘記給金幣了 sorry 2013-06-20 08:28:29
ranranxing: 金幣+3, ★★★很有幫助 2013-06-24 10:07:19
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又是一個(gè)苦逼的，3race還是很好做的，takara的試劑盒足夠了(雖然不想用日本貨)。要是5race的話，clontech [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
2樓2013-06-20 06:21:03
ranranxing
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3樓2013-06-20 22:11:03
ranranxing
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5樓2013-06-21 11:15:45
z7531242
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ranranxing: 金幣+2, ★★★很有幫助 2013-06-21 13:56:07
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3端好做 5端不容易做~~ 除了驗(yàn)證基因表現(xiàn)外---做RACE調(diào)全長(zhǎng)可能想看是否有Alternative splicing 的現(xiàn)象!! 純屬個(gè)人見(jiàn)解，還請(qǐng)各位大師指教^^ |
7樓2013-06-21 11:30:20
ranranxing
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8樓2013-06-21 13:49:26
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9樓2013-06-22 11:13:19
liuwt2008
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10樓2013-06-23 09:27:55
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