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371522029金蟲 (正式寫手)
小魚兒
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[求助]
peasy-t3 cloning kit CT301-2
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我們實(shí)驗(yàn)室用這一套體系連接座基因文庫。我現(xiàn)在剛剛接手。 我們有PEGM-easy,PEGM-T3,里面還有control primers,M13F.在盒子里面還有T4連接酶。 有一個(gè)師兄說只要用PCR回收產(chǎn)物和PEGM-EASY按一定的量混合,25度15min就可以連接完成。我按這個(gè)方法做了幾次,氨芐IPTG,XGal平板上幾乎沒有菌落,有也是幾個(gè)子。重復(fù)了幾次都是這樣。我現(xiàn)在懷疑是不是連接的時(shí)候不是這樣做。請(qǐng)教涌過跟我們同樣產(chǎn)品的人指教。。。 |
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