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vvsober木蟲 (小有名氣)
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[求助]
樣品幾乎不溶于水，怎么做體外抗腫瘤啊
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| 我的樣品是糖脂類，在有機(jī)溶劑里溶解度好，在水里幾乎不溶，欲用MTT法測其體外抗腫瘤活性，要怎么將樣品溶到培養(yǎng)基里？之前試過DMSO，可以溶樣品，可是加到培養(yǎng)基里以后又變成了絮狀物，溶解不了。。是我用的DMSO太少了么？怕用多了對細(xì)胞有毒性啊。。求指點。謝謝。 |
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xiaoxiao270: 金幣+2 2013-06-23 19:29:24
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| 你好，這個問題我以前遇到過。我的解決方法是，先將樣品溶解到DMSO中，然后在取少量DMSO樣品混合液，慢慢加到培養(yǎng)基中，加完后，用移液槍吹打幾次，分散均勻即可。在這個過程中，要注意兩點，一是用DMSO溶解樣品的時候，盡可能得降低樣品在DMSO中的濃度（因為DMSO越多，加到培養(yǎng)液中，樣品析出的可能性越小，一般DMSO的濃度控制在0.1%或者更小，并以此濃度做空白對照，對細(xì)胞損傷不大）。二是加的時候，要把DMSO-樣品混合液慢慢加到培養(yǎng)基中，不要加反，也不要加的過快。 |
2樓2013-06-23 19:23:28
langshi1712
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
vvsober: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-06-24 14:44:00
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vvsober: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-06-24 14:44:00
| 你好，這個問題我以前遇到過。我的解決方法是，先將樣品溶解到DMSO中，然后在取少量DMSO樣品混合液，慢慢加到培養(yǎng)基中，加完后，用移液槍吹打幾次，分散均勻即可。在這個過程中，要注意兩點，一是用DMSO溶解樣品的時候，盡可能得降低樣品在DMSO中的濃度（因為DMSO越多，加到培養(yǎng)液中，樣品析出的可能性越小，一般DMSO的濃度控制在0.1%或者更小，并以此濃度做空白對照，對細(xì)胞損傷不大）。二是加的時候，要把DMSO-樣品混合液慢慢加到培養(yǎng)基中，不要加反，也不要加的過快。 |
3樓2013-06-23 19:23:50
gslzzhixin
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4樓2013-06-23 23:29:40
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【答案】應(yīng)助回帖
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vvsober: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-06-24 14:43:48
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vvsober: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-06-24 14:43:48
| DMSO 的含量應(yīng)該是0.1%以下沒有問題。我覺得你的藥物應(yīng)該先搞清楚抗腫瘤的機(jī)制，是現(xiàn)有的藥物還是新發(fā)現(xiàn)的？我猜應(yīng)該是新發(fā)現(xiàn)的，個人感覺你可以嘗試直接制備成膠體藥物進(jìn)行細(xì)胞實驗，或者化學(xué)手段改善溶解性后再試。因為我覺得如果一個藥物，抗腫瘤作用是在細(xì)胞水平的機(jī)制的話，首先應(yīng)該可以透過細(xì)胞膜，這么低的溶解性，logP 值不合適，難以透過細(xì)胞膜，怎么考察抗腫瘤的作用呢？ |
5樓2013-06-24 13:57:55
vvsober
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6樓2013-06-24 14:41:57
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7樓2013-06-24 14:43:37
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