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fayzhao金蟲 (小有名氣)
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[求助]
過期trizol可以用嗎
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大家好， 我最近提取線蟲RNA，效果很差。測(cè)的OD值還可以，但是跑電泳結(jié)果很不好，能看到三條帶，但是不清晰。 師姐說trizol已經(jīng)有三年了，不知道有沒有人用過過期的trizol呀？效果怎樣呢？ 求大家?guī)蛶臀�，O(∩_∩)O謝謝啦！ 這次提的RNA電泳圖.jpg 去年提的RNA電泳圖.jpg [ Last edited by fayzhao on 2013-6-27 at 10:50 ] |
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chuqiqi19
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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流經(jīng)驗(yàn) 2013-06-27 16:14:10
gyesang: 回帖置頂 2013-07-02 02:47:48
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你要知道trizol提取RNA的原理是什么。TRIZOL的PH值對(duì)于提取RNA很重要的，過期的trizol的ph值變化厲害，所以已經(jīng)不適合提取RNA了。trizol的主要成分是苯酚，苯酚能裂解細(xì)胞，也能使蛋白質(zhì)變性，此外trizol中還有一些其它物質(zhì)來抑制內(nèi)外源RNA酶的活性，加入trizol后樣品分為有機(jī)相和水相，核酸會(huì)在水相中，蛋白質(zhì)會(huì)在有機(jī)相中只有在酸性ph下DNA和RNA才能有效的分層。 你提取的RNA有降解，更多的是基因組污染，所以更換trizol是必要的，當(dāng)然，操作過程中也需要注意別有rna酶污染。 祝你好運(yùn) |
5樓2013-06-27 15:20:30
cnliu51
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太感謝你啦，那我還是換瓶trizol試試吧，O(∩_∩)O謝謝！ 6樓2013-06-27 15:24:02
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10樓2013-06-27 23:13:16
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