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ctbctbctb新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于解淀粉芽孢桿菌基因敲除問題 已有2人參與
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本人在做解淀粉芽孢桿菌的基因敲除,用的是熱敏型質(zhì)粒PVS7, 左右同源臂加起來大小為1400bp的片段, 將該片段和PVS7連接成重組質(zhì)粒, 經(jīng)酶切和電泳驗(yàn)證, 片段大小正確且只有1條帶,但轉(zhuǎn)化到解淀粉芽孢桿菌以后, 剛轉(zhuǎn)化的重組菌做菌落PCR,發(fā)現(xiàn)有兩條帶,1條為目的片段1400bp,還有1條在1000bp左右; 而且重組菌傳代后, 只有1000bp的一條帶, 1400bp的帶缺消失了. 用引物擴(kuò)增原始菌和空質(zhì)粒并沒有1000bp的片段. 請問各位高手,究竟是什么原因呢? |
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2樓2015-01-14 11:04:47
why9639
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7樓2019-07-21 00:17:39
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