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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 專業(yè)學科區(qū) » 地學 » 土壤學 » 關于土壤酶活測定的問題
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關于土壤酶活測定的問題
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最近測土壤脲酶活性，用的方法如下： 稱取5g土樣于50ml三角瓶中，加1ml甲苯，振蕩均勻，15min后加10ml10%尿素溶液和20ml PH 6.7檸檬酸鹽緩沖溶液，搖勻后在37℃恒溫箱培養(yǎng)24小時。培養(yǎng)結(jié)束后過濾，過濾后取1ml濾液加入50ml容量瓶中，再加4ml苯酚鈉溶液和3ml次氯酸鈉溶液，隨加隨搖勻。20min后顯色，定容。1h內(nèi)在分光光度計與578nm波長處比色。（靛酚的藍色在1h內(nèi)保持穩(wěn)定）。 標準曲線制作：在測定樣品吸光值之前，分別取0、1、3、5、7、9、11、13ml氮工作液，移于50ml容量瓶中，然后補加蒸餾水至20ml。再加入4ml苯酚鈉溶液和3ml次氯酸鈉溶液，隨加隨搖勻。20min后顯色，定容。1h內(nèi)在分光光度計上于578nm波長處比色。然后以氮工作液濃度為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪制標準曲線。 注意事項: 1、每一個樣品應該做一個無基質(zhì)對照，以等體積的蒸餾水代替基質(zhì)，其他操作與樣品實驗相同，以排除土樣中原有的氨對實驗結(jié)果的影響。 2、整個實驗設置一個無土對照，不加土樣，其他操作與樣品實驗相同，以檢驗試劑純度和基質(zhì)自身分解。 3、如果樣品吸光值超過標曲的最大值，則應該增加分取倍數(shù)或減少培養(yǎng)的土樣 四、結(jié)果計算： 以24小時后1g土壤中NH3－N的毫克數(shù)表示土壤脲酶活性（Ure）。 Ure=（a樣品－a無土－a無基質(zhì)）×V×n／m 式中：a樣品為樣品吸光值由標準曲線求得的NH3－N毫克數(shù)； a無土為無土對照吸光值由標準曲線求得的NH3－N毫克數(shù)； a無基質(zhì)為無基質(zhì)對照吸光值由標準曲線求得的NH3－N毫克數(shù)； V為顯色液體積；n為分取倍數(shù)，浸出液體積／吸取濾液體積；m表示烘干土重 在最后的計算時，請問顯色液的體積是多少？浸出液體積和吸取濾液體積又分別是多少呢？ |
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4樓2018-08-15 17:29:14
2樓2013-12-08 14:24:31
3樓2018-08-15 17:26:01
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