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貼壁細(xì)胞中SOD,GPX,CAT,MDA活力的測(cè)定
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| 請(qǐng)問一下各位,貼壁細(xì)胞中SOD,GPX,CAT,MDA活力是如何測(cè)定的?首先,裂解細(xì)胞的時(shí)候,大家用的是超聲嗎?超聲的具體條件能講解一下嗎?由于我們實(shí)驗(yàn)室的變幅桿是破細(xì)菌用的,沒有小號(hào)的,我打算用RIPA裂解液裂解細(xì)胞離心取上清做。由于我們用的藥物量比較少,所以我只能用6孔板接種細(xì)胞,后再給藥。但是這樣子一個(gè)孔也只是加入150ul的裂解液。150ul的裂解液所得的細(xì)胞上清的量能夠用于SOD,GPX,CAT,MDA這四種指標(biāo)的檢測(cè)嗎?還有SOD,GPX,CAT最終濃度的單位是依據(jù)細(xì)胞總蛋白量,用U/毫克蛋白表示嗎?還是依據(jù)上清體積,用U/ml來表示?由于第一次做,不是很明白,也是剛接觸這方面的實(shí)驗(yàn),所以大家指教一下。! |
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