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polymeryjh

金蟲 (正式寫手)

[求助] 做HPLC之前的SPE

向大家求助
我的樣品要做HPLC, 可是溶劑是人工海水.所以做之前必須除去里面的鹽. 我看文獻(xiàn)里面常用的方法是SPE技術(shù). 有沒有人做過類似的SPE C18 除鹽的實(shí)驗(yàn)啊. 麻煩回答下我下面的疑問
1.SPE C18柱子除鹽的效果好嗎? 過了柱子之后再做HPLC時對柱子還有傷害嗎?
2. SPEC18柱子除鹽該怎么做啊? 我看了下其他的帖子. 好像是說先用甲醇之類的溶劑活化柱子 然后再添加樣品 然后再洗脫收集樣品. 我想請問在我的這個實(shí)驗(yàn)中,那個鹽是不是已經(jīng)吸附在柱子上了, 不會從柱子中出來,所以我收集到的基本上都是無鹽的樣品.
3. 這個柱子大家都是在哪里買的啊 價格怎么樣啊 我剛才給代理商打了個電話 說要幾千塊. 這么貴估計(jì)老板不會同意.
4. 關(guān)于SPE我有看到有那種配套的全自動的裝置, 但是也看到有蟲子說用SPE小柱, 我想問 SPE小柱是不是就和我們平時用的Al2O3的那種柱子一樣裝置啊 還是必須有配套的其他儀器啊 .
謝謝大家
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機(jī)會為有準(zhǔn)備的人準(zhǔn)備
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銅蟲 (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
polymeryjh: 金幣+10, ★★★很有幫助, thks 2013-07-11 19:03:03
基本是這樣的順序
1,condition         一般是用methanol
2,equilibrate       用水
3,load           你所要被分離的sample
4,wash          可以洗脫雜質(zhì)的溶液  在這一步應(yīng)該是你想要除鹽
5,elute         洗脫下來你想要保留的物質(zhì)
堅(jiān)持就是勝利
14樓2013-07-11 08:48:22
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鴨綠江畔

鐵桿木蟲 (著名寫手)

牛B

引用回帖:
3樓: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-10 14:09:26
C18是反相的 鹽應(yīng)該是吸附在上面的吧 還有 這個必須聯(lián)用真空泵嗎...

鹽是不保留的。
那些設(shè)備,都是加快樣品處理速度的。沒什么是必須的
我那么努力,就是為了在更高的層次遇見你!
4樓2013-07-10 14:48:54
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0812502012

銅蟲 (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
引用回帖:
9樓: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-10 15:45:47
我的物質(zhì)是異噻唑啉酮 微溶于水 在室溫下 水中的溶解度為6mg/L...

微溶于水肯定淋洗的時候會隨雜質(zhì)留下來,回收率受到影響,過了柱子再進(jìn)HPLC問題不是很大,我做實(shí)驗(yàn)的時候雜質(zhì)峰變少而且小了,我們用的SPE柱是自己裝的,比買裝好的便宜一些,一樣用
好好學(xué)習(xí)天天向上
10樓2013-07-10 17:25:07
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鴨綠江畔

鐵桿木蟲 (著名寫手)

牛B

引用回帖:
7樓: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-10 15:20:18
我看其他書上說 先淋洗去雜質(zhì) 再快速沖洗得到目標(biāo)物
我想請問 后面的一步為什么要很快啊   假如和前一步一樣 都只是靠重力留下來會有什么問題嗎?...

快速淋洗,是為了降低待測物質(zhì)在柱子上的死吸附
我那么努力,就是為了在更高的層次遇見你!
15樓2013-07-11 08:48:34
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鴨綠江畔

鐵桿木蟲 (著名寫手)

牛B

引用回帖:
16樓: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-11 19:05:10
請問你用過SPE C18的柱子嗎 是什么牌子的啊 比較好用實(shí)惠啊...

所有牌子都是這個操作順序
我那么努力,就是為了在更高的層次遇見你!
18樓2013-07-12 11:24:16
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普通回帖

鴨綠江畔

鐵桿木蟲 (著名寫手)

牛B

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
polymeryjh: 金幣+10, ★★★很有幫助, 謝謝 2013-07-10 13:30:35
1.效果好不好,的用不同廠家的同一型號做橫向比較。對HPLC會起到保護(hù)作用
2.鹽不是吸附在柱子上,而是先被洗脫下來,你的待測物質(zhì)留在柱子上
3.好幾千的,那是進(jìn)口的吧。國產(chǎn)有,你百度一下吧,有國產(chǎn)貨,相對便宜些
4.固相自動萃取裝置是很貴的,那裝置就是大部分代替手工操作。有與沒有,都不影響你做實(shí)驗(yàn)。
我那么努力,就是為了在更高的層次遇見你!
2樓2013-07-10 13:26:26
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polymeryjh

金蟲 (正式寫手)

引用回帖:
2樓: Originally posted by 鴨綠江畔 at 2013-07-10 13:26:26
1.效果好不好,的用不同廠家的同一型號做橫向比較。對HPLC會起到保護(hù)作用
2.鹽不是吸附在柱子上,而是先被洗脫下來,你的待測物質(zhì)留在柱子上
3.好幾千的,那是進(jìn)口的吧。國產(chǎn)有,你百度一下吧,有國產(chǎn)貨,相對便宜 ...

C18是反相的 鹽應(yīng)該是吸附在上面的吧 還有 這個必須聯(lián)用真空泵嗎
機(jī)會為有準(zhǔn)備的人準(zhǔn)備
3樓2013-07-10 14:09:26
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polymeryjh

金蟲 (正式寫手)

引用回帖:
4樓: Originally posted by 鴨綠江畔 at 2013-07-10 14:48:54
鹽是不保留的。
那些設(shè)備,都是加快樣品處理速度的。沒什么是必須的...

那我的物質(zhì)的良溶劑是甲醇, 我可以把溶液放到柱子里面后 先用水把鹽洗出來 然后再用甲醇把樣品洗出來嗎
機(jī)會為有準(zhǔn)備的人準(zhǔn)備
5樓2013-07-10 14:54:54
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鴨綠江畔

鐵桿木蟲 (著名寫手)

牛B

引用回帖:
5樓: Originally posted by polymeryjh at 2013-07-10 14:54:54
那我的物質(zhì)的良溶劑是甲醇, 我可以把溶液放到柱子里面后 先用水把鹽洗出來 然后再用甲醇把樣品洗出來嗎...

可以
我那么努力,就是為了在更高的層次遇見你!
6樓2013-07-10 14:59:33
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polymeryjh

金蟲 (正式寫手)

引用回帖:
6樓: Originally posted by 鴨綠江畔 at 2013-07-10 14:59:33
可以...

我看其他書上說 先淋洗去雜質(zhì) 再快速沖洗得到目標(biāo)物
我想請問 后面的一步為什么要很快啊   假如和前一步一樣 都只是靠重力留下來會有什么問題嗎?
機(jī)會為有準(zhǔn)備的人準(zhǔn)備
7樓2013-07-10 15:20:18
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ufoking

木蟲 (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖

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polymeryjh: 金幣+5, 有幫助 2013-07-11 08:34:53
不知道你做的是什么物質(zhì),但是既然是溶于水的想必極性不會小,想在C18柱上保留可能很難
8樓2013-07-10 15:30:26
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polymeryjh

金蟲 (正式寫手)

引用回帖:
8樓: Originally posted by ufoking at 2013-07-10 15:30:26
不知道你做的是什么物質(zhì),但是既然是溶于水的想必極性不會小,想在C18柱上保留可能很難

我的物質(zhì)是異噻唑啉酮 微溶于水 在室溫下 水中的溶解度為6mg/L
機(jī)會為有準(zhǔn)備的人準(zhǔn)備
9樓2013-07-10 15:45:47
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