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鐵蟲 (初入文壇)

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在線: 70.5小時(shí)
蟲號(hào): 2009773
注冊(cè): 2012-09-18
專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)

[求助] 關(guān)于提取真菌細(xì)胞內(nèi)酶的問(wèn)題

我做的是黑曲霉還原六價(jià)鉻的細(xì)胞與酶的性質(zhì)研究，其中，有一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是，將菌體過(guò)夜培養(yǎng)后，分別用上清液，靜息細(xì)胞，通透細(xì)胞和細(xì)胞內(nèi)提取物來(lái)處理六價(jià)鉻。這部分的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是參考文獻(xiàn)上的做的，但是有幾個(gè)問(wèn)題一直想不明白，求各位蟲友指點(diǎn)迷津：
1，為什么要過(guò)夜培養(yǎng)，把菌懸液加入液體培養(yǎng)基后過(guò)夜培養(yǎng)出的菌體特別少，處理完之后就只剩下一點(diǎn)點(diǎn)了，再去還原六價(jià)鉻，感覺東西太少，重金屬直接就使酶失活了，會(huì)不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；
2，通透細(xì)胞的制備，文獻(xiàn)上面方法不一，而且很多只說(shuō)是用吐溫-80和甲苯處理，一般不會(huì)提到用量的問(wèn)題，不知道細(xì)胞和加入試劑的比例如何控制；
3，提取細(xì)胞內(nèi)還原酶的時(shí)候，用超聲波細(xì)胞破碎儀，功率，時(shí)間應(yīng)該如何控制。
因?yàn)檫@個(gè)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)反復(fù)做過(guò)好幾次了，實(shí)驗(yàn)結(jié)果都不太理想，還請(qǐng)各位了解這方面的蟲友多多指教

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1樓 2013-07-11 14:23:28

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