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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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flycpu

新蟲 (小有名氣)

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[交流] 色譜柱的選擇，水相調(diào)pH置7.9，是否可以選用pH范圍2-9的色譜柱？

水相調(diào)pH置7.9，水相：有機相=65：35，整體pH7.5左右，先選用一根pH2-9的色譜住，分離效果均較好，但是連續(xù)實驗3-5天，柱效會有所下降，沖一沖也就好了，可以繼續(xù)做下去嗎？

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1樓 2013-07-27 18:59:40

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haill005

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flycpu: 金幣+1 2013-07-29 12:38:18

???????:

2?: Originally posted by yurong1000 at 2013-07-27 22:25:51
?????????????????????????е??????????????л????????棬???黻????????

你好，想請教一下，水相比例具體是怎么規(guī)定的？我們平常實驗都用到 70：30 了阿

[ ????С??????? ]

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5樓2013-07-28 08:51:53

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yurong1000

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flycpu(zhychen2008代發(fā)): 金幣+1, 多謝參與 2013-07-27 23:58:41

可以是可以，就是你的水相的比例有點太高了，如果用的有機相是乙腈，建議換成甲醇試試

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2樓2013-07-27 22:25:51

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cpu40

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2樓: Originally posted by yurong1000 at 2013-07-27 22:25:51
可以是可以，就是你的水相的比例有點太高了，如果用的有機相是乙腈，建議換成甲醇試試

65%的水相還高？？？

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4樓2013-07-28 08:48:56

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浮生曲

新蟲 (初入文壇)

沒什么問題

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6樓2013-07-28 08:56:19

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News

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flycpu: 金幣+1 2013-07-29 12:38:36

可能在混合后流動相的pH發(fā)生了些許改變，例如上升，
兩個方法：1、加大緩沖液濃度，提高緩沖液的緩沖能力，不過一般緩沖鹽的濃度不會超過50mmmol，超過了穩(wěn)定性和重現(xiàn)性不太好----書籍，我自己還沒試過。
2.買根pH范圍寬的色譜柱，Agilent 的ZORBAX Extend-c18/8系列的范圍很寬 2~11.5
另外，色譜柱的正常使用與維護(hù)對于色譜柱的壽命十分重要。

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7樓2013-07-28 13:42:12

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duliuhui

金蟲 (正式寫手)

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感覺PH沒什么問題，平時做完及時沖洗色譜柱就好。先用不含鹽的流動相過渡除鹽，再用純有機相沖洗柱子。

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8樓2013-07-28 15:37:26

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linglingF8

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flycpu: 金幣+1 2013-07-29 12:36:43

告知：你這個方法必然會損壞柱子，研發(fā)是需要成本的，我們用WatersT3柱一根要8000多，一個項目下來20多根也非常正常的。看你們這個品種有沒有這個潛力需不需要這樣投入。不要相信賣柱子的，好柱子是會有一定的區(qū)別的，但是對于目前這種研發(fā)強度他們的柱子是完全受不了的。想想怎么樣改善方法吧!!

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9樓2013-07-29 10:56:49

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flycpu

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9樓: Originally posted by linglingF8 at 2013-07-29 10:56:49
告知：你這個方法必然會損壞柱子，研發(fā)是需要成本的，我們用WatersT3柱一根要8000多，一個項目下來20多根也非常正常的�？茨銈冞@個品種有沒有這個潛力需不需要這樣投入。不要相信賣柱子的，好柱子是會有一定的區(qū)別的 ...

已經(jīng)用這根柱子做方法學(xué)了怎么辦現(xiàn)在用的是安捷倫ZORBAX Eclipse Plus 色譜柱柱效拖尾因子都可以就是柱效下降的快每次用完要好好的沖然后會恢復(fù)一點不知道怎么辦了

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10樓2013-07-29 11:18:40

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flycpu

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8樓: Originally posted by duliuhui at 2013-07-28 15:37:26
感覺PH沒什么問題，平時做完及時沖洗色譜柱就好。先用不含鹽的流動相過渡除鹽，再用純有機相沖洗柱子。

我也希望如此

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11樓2013-07-29 12:37:03

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flycpu

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7樓: Originally posted by News at 2013-07-28 13:42:12
可能在混合后流動相的pH發(fā)生了些許改變，例如上升，
兩個方法：1、加大緩沖液濃度，提高緩沖液的緩沖能力，不過一般緩沖鹽的濃度不會超過50mmmol，超過了穩(wěn)定性和重現(xiàn)性不太好----書籍，我自己還沒試過。
...

混合后的pH 7.5左右

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12樓2013-07-29 12:38:06

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mafansile

銅蟲 (小有名氣)

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pH2~9的柱子適合的范圍其實是在7以下的，7以上也可以用，就是壞的快一點

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13樓2013-07-29 14:56:07

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linglingF8

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10樓: Originally posted by flycpu at 2013-07-29 11:18:40
已經(jīng)用這根柱子做方法學(xué)了怎么辦現(xiàn)在用的是安捷倫ZORBAX Eclipse Plus 色譜柱柱效拖尾因子都可以就是柱效下降的快每次用完要好好的沖然后會恢復(fù)一點不知道怎么辦了...

不管他，沒辦法你開發(fā)的這個方法最好的話哪還管他呢，我們經(jīng)常會遇到這種情況，Waters的柱子要比安捷倫的好一點。要一個耐堿的

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14樓2013-07-29 17:18:12

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flycpu

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14樓: Originally posted by linglingF8 at 2013-07-29 17:18:12
不管他，沒辦法你開發(fā)的這個方法最好的話哪還管他呢，我們經(jīng)常會遇到這種情況，Waters的柱子要比安捷倫的好一點。要一個耐堿的...

藥典的一個方法要求的是菲羅們luna的C18 因為當(dāng)時實驗室沒有用了根實驗室已有的做出來柱效峰形分離度都很好就一直用下去了現(xiàn)在2-3天連續(xù)做實驗的話第一天15000柱效到第三天就剩12000了哎而且有一根柱子拖尾因子增加了很多正活化呢不懂能不能用了現(xiàn)在就兩根換著用

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15樓2013-07-29 17:58:52

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飛燕-五星巖

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表示同情，我還比你慘，我那條件還比你的苛刻！我都快被逼瘋了

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16樓2013-07-29 20:28:42

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sjz_zhaonan

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我們pH9的流動相也用的pH2-9的柱子。用完一定要好好沖洗，否則柱效下降很快。

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17樓2013-07-29 22:40:38

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linglingF8

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15樓: Originally posted by flycpu at 2013-07-29 17:58:52
藥典的一個方法要求的是菲羅們luna的C18 因為當(dāng)時實驗室沒有用了根實驗室已有的做出來柱效峰形分離度都很好就一直用下去了現(xiàn)在2-3天連續(xù)做實驗的話第一天15000柱效到第三天就剩12000了哎而且有一根柱子拖尾 ...

菲羅們luna的C18 5.0μm的才2000，3.5μm的才2500。如果是法定方法，人家用這個放必定有人家的道理呀，CDE的老師，特別喜歡有標(biāo)準(zhǔn)的方法。將性高是會把柱子上的鍵合基融掉，因此很難修復(fù)。不像親水柱努努力可以恢復(fù)個10%

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18樓2013-07-30 13:51:33

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linglingF8

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剛才仔細(xì)看了一下，2-3天連續(xù)用？，白天8小時工作用，這根拿去沖洗，用另外一根。

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19樓2013-07-30 13:54:42

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caff

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ZORBAX Extend系列的范圍是沒有C8的，只有C18，另外waters X-Bridge，和X-terra系列也是耐堿的，

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20樓2013-07-30 16:04:53

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18樓: Originally posted by linglingF8 at 2013-07-30 13:51:33
菲羅們luna的C18 5.0μm的才2000，3.5μm的才2500。如果是法定方法，人家用這個放必定有人家的道理呀，CDE的老師，特別喜歡有標(biāo)準(zhǔn)的方法。將性高是會把柱子上的鍵合基融掉，因此很難修復(fù)。不像親水柱努努力可以恢復(fù) ...

他給我報價3000左右呢安捷倫柱子買了還要4000 因為聽說菲羅們的不太好用當(dāng)時就沒買現(xiàn)在有點小后悔了 USP顯示品牌是luna

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21樓2013-07-30 17:08:02

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flycpu

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19樓: Originally posted by linglingF8 at 2013-07-30 13:54:42
剛才仔細(xì)看了一下，2-3天連續(xù)用？，白天8小時工作用，這根拿去沖洗，用另外一根。...

有時候連續(xù)個40-50小時太費了以后不能這么做了

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22樓2013-07-30 17:08:59

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yingying15883樓

2013-07-27 22:52 回復(fù)

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[交流] 色譜柱的選擇，水相調(diào)pH置7.9，是否可以選用pH范圍2-9的色譜柱？

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