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liushuizhf鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
蛋白變性
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| 本人在做蛋白純化，蛋白C端加有6個(gè)His標(biāo)簽，N端加有信號肽，目的蛋白分泌到發(fā)酵液里，現(xiàn)在一直純化不到目的蛋白，懷疑是不是His標(biāo)簽被包裹在蛋白里，想通過蛋白變性以達(dá)到純化的目的，100℃煮發(fā)酵液可不可以啊，誰做過相關(guān)內(nèi)容，請賜教��！ |
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2樓2013-07-30 12:58:23
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3樓2013-07-30 13:59:54
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5樓2013-07-31 08:32:59
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6樓2013-07-31 13:08:43
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 還真沒碰到過蛋白會分泌到體外的情況。。跑蛋白電泳的時(shí)候發(fā)酵液的上樣量是多少？條帶明顯不明顯？用鹽酸胍可以變性，但是不是簡單的加入進(jìn)去就行。是要一定濃度的。而且不僅僅是鹽酸胍還需要加別的鈉鹽。另外尿素是在后面讓蛋白梯度復(fù)性的時(shí)候用到的，有用尿素來變性的嗎？這點(diǎn)不是很清楚。 |
7樓2013-07-31 13:57:57
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9樓2013-07-31 17:28:19
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10樓2013-09-23 15:16:23
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