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6771815銅蟲(chóng) (小有名氣)
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本人在做WB中經(jīng)常遇到幾個(gè)問(wèn)題,無(wú)助,希望得高手指點(diǎn): 1.如何做>150KD的蛋白檢測(cè)?除了調(diào)整膠濃度之外,有沒(méi)有其它要注意的?或是在樣品處理,跑膠轉(zhuǎn)膜中要怎么做? 2.如何做<15KD的蛋白檢測(cè)?除了解決膠濃度外,膜用0.2um孔徑,還有沒(méi)有其它辦法,同時(shí)小分子在跑膠過(guò)程中,小分的蛋白容易彌散或是出現(xiàn)不規(guī)則的條帶或分布,有沒(méi)有解決辦法? 3.在做組織蛋白檢測(cè)中,怎么樣去除其中的雜質(zhì)干擾(比如糖類,脂類物),這些會(huì)導(dǎo)致在跑膠中使蛋白樣品走膠變形,或是導(dǎo)致樣口在膠中不規(guī)則分布,同時(shí)在小分子量蛋白中會(huì)容易彌散.這是不是關(guān)鍵在樣品處理上有問(wèn)題?應(yīng)該怎么處理呢?一般我是用組織勻漿器勻漿.后離心的.我懷疑是否是組織樣取得太多? 期盼WB高手給予解決意見(jiàn). |
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