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想測金屬和蛋白結(jié)合后的紫外吸收峰變化，用什么溶劑好？
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我想通過看蛋白加了金屬后紫外吸收峰的變化來確定是否此金屬能結(jié)合到蛋白上。做了一次實驗，用Tris-HCl 做溶劑，測出來好多峰，和文獻上的不一樣，而且沒有找到特異的峰，文獻上用的hepes buffer,所以我又換成hepes，但是我的金屬二價銅溶在hepes里時變成了不透明的淡藍色，稀釋以后變透明了。用hepes做了后發(fā)現(xiàn)幾乎和Tris一樣，還是很多峰。請問這正常嗎？我到底該用怎樣的溶劑比較好？另外：文獻上說265nm是一價銅與蛋白結(jié)合形成的硫醇鹽的特異的峰，那我做的是二價銅，最大峰應(yīng)該在哪兒呢？ 第一張圖是兩種Buffer單獨測的紫外吸收。第二張是用hepes里溶了二價銅測的值與單獨hepes的值放在一起。 DI4{0]H)VSV4%HKY~QM9A{K.jpg ~)V_T)L]2MDTOC8NNB25B(Q.jpg |
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