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稀巴爛銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
反硝化功能基因反應(yīng)條件摸索~~~ 已有1人參與
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| 如題，摸索了好長(zhǎng)一段時(shí)間的反應(yīng)條件，在反硝化過(guò)程中從NO3 -還原成NO2 -的過(guò)程中，很多文獻(xiàn)都是用narG-1960F（TAYGTSGGSCARGARAA） & narG-2650R(TTYTCRTACCABGTBGC），反應(yīng)條件為：95℃-5min；95℃-30s/59 to 55℃-30s/72℃-45s（前八個(gè)循環(huán)每一個(gè)循環(huán)-0.5℃，后30cycles保持55℃）；72℃-10min。退火溫度也換了幾次，但是因?yàn)槭沁f減pcr，又不能做梯度pcr，換了好幾種酶（Ex Taq、HS Taq、MightAmp DNA Polymerase、加BSA也沒(méi)用），這功能基因不知道有哪位蟲(chóng)友做過(guò)呢？謝謝啦~ |
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迷路小小書(shū)童
新蟲(chóng) (初入文壇)
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- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
2樓2014-07-21 15:12:13
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