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bianyu

銅蟲 (正式寫手)

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帖子: 380
在線: 97.2小時(shí)
蟲號(hào): 895412
注冊: 2009-11-06
專業(yè): 中藥學(xué)其他科學(xué)問題

[求助] SSH在研究植物體內(nèi)代謝產(chǎn)物生物合成途徑的相關(guān)問題

請教蟲友有關(guān)抑制性差減文庫SSH的一些問題，看了些文獻(xiàn)有采用SSH研究某種活性成分生物合成途徑的，說明具有可行性，我也想做這方面的工作，但是以前沒有做過，所以想從做過這方面的蟲友那詳細(xì)了解下，望大家不吝賜教
1）建立SSH文庫，對樣品RNA的質(zhì)量要求如何？
2）如果在樣品RNA制備好的基礎(chǔ)上，建立SSH文庫大概需要多長時(shí)間（一般來講）？受哪些因素的影響比較大？
3）是不是只要處理和對照的目標(biāo)產(chǎn)物差別較大，就能建立差減文庫（就能篩出差異表達(dá)的基因，看有的文獻(xiàn)篩出來的差異基因的個(gè)數(shù)相差很大），而篩出來的基因能夠起調(diào)控作用的概率大概有多少？
4）依據(jù)SSH得出的結(jié)論，必須通過RT-PCR或WB來驗(yàn)證嗎？
暫時(shí)想到這些，先謝謝各位了！

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1樓 2013-08-23 17:26:26

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